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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 急！急！急！跑胶没有条带，请问这是因为什么？
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清雅风

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我想默默地问一下楼主，你看胶的时候把做胶的板取掉没有？
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朝着自己的理想奔跑，就是幸福！
11楼2015-05-09 17:28:47
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Lotus_ping

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-10 22:55:59
DNA模板是否降解？可以换个模板检测一下PCR条件是否有问题，如果没有问题只能一个个换试剂来寻找PCR问题了
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12楼2015-05-09 21:42:42
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酒家何处

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-05-10 22:56:21
首先，Marker能看到。说明不是电泳的问题。预计pcr产物片段多大。从最下面样品有淡淡的亮，他可能是引物或者二聚体。引物出现降解失效的概率很小。所以问题出现在pcr扩增。。。。

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13楼2015-05-09 22:40:10
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酒家何处

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

还有就是引物浓度是多少。50ul加4ul过多了。模板加了4ul。。。。这个也太多了但是电泳看不见模板的条带。不知道模板检测过没有。。如果模板确定有。引物没问题。酶没有坏。可能就是tm值的问题

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14楼2015-05-09 22:43:11
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安道尔

铜虫 (正式写手)
那我算幸运的，学了1次，重复3次，效果都不错，就是EB有毒，不小心就会溅。。。。

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15楼2015-05-09 23:01:33
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wyqzl

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 以后2012 at 2015-05-09 15:37:02
可能是引物失效了，你一一排除原因吧

可能引物搞错了吧。胶应该没问题，电压似乎有点不稳定。或者退火温度有问题

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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16楼2015-05-11 18:25:23
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)
太粗糙，做好陰性，陽性對照，這樣比較好找原因。你可以考慮以下幾個因素:模板有沒有問題，引物，pcr程序是不是合適，主要退火溫度

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天道酬勤
17楼2015-05-11 22:51:32
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wuwenmei

新虫 (小有名气)
marker都有问题，都没有跑开，重新跑吧，
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下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
18楼2015-05-12 10:35:35
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zybqx

银虫 (小有名气)
你说你师姐之前做得出来，你做不出来，你师姐提的DNA比你好，所以对buffer浓度要求不高，你做不出来可能是你DNA不纯，你把buffer浓度提高试试。我觉得你们的buffer浓度太低了，我们用的buffer都是510 buffer 配500的水
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19楼2015-05-22 08:50:20
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