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penguin1228

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助毛细管电泳研究药物与蛋白相互作用遇到的一些问题

我是用毛细管电泳紫外检测研究药物与蛋白相互作用,遇到了一些问题,十分郁闷,现在处在崩溃的边缘,希望有好心人能够帮我解答一下,十分感谢
1.重现性不好,特别是把蛋白作为缓冲溶液添加剂的时候,药物的峰差异不大与标记物的迁移时间差值不重现
2.蛋白和药物的淌度差异不明显的话,是不是意味着蛋白或药物与结合物的淌度差也很小,这样的话是不是不满足淌度迁移法的条件?
3.如何判断淌度迁移法适不适用于某种药物和蛋白的相互作用研究?
4.前沿分析法中,配制不同浓度比的药物和蛋白,浓度该如何选择?

[ Last edited by penguin1228 on 2008-7-11 at 15:31 ]
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penguin1228

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by platto at 2008-7-11 15:35:
你用的是什么毛细管,如果用裸管,蛋白质将会与毛细管内壁发生严重的吸附作用,从而导致信号峰的迁移时间和峰面积重现性变差.建议你使用涂层毛细管进行电泳,来消除这种吸附作用.
个人认为,如果你研究的蛋白质为酸 ...

但是文献中通常是用非涂层柱来做的,线性很好啊,缓冲液pH值是7-8之间,另外个人认为涂层柱的重现性更不好...
3楼2008-07-11 15:58:37
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通


dnp(金币+1,VIP+0):谢谢,请继续关注讨论^_^
你用的是什么毛细管,如果用裸管,蛋白质将会与毛细管内壁发生严重的吸附作用,从而导致信号峰的迁移时间和峰面积重现性变差.建议你使用涂层毛细管进行电泳,来消除这种吸附作用.
个人认为,如果你研究的蛋白质为酸性蛋白质,可以适当增大电泳缓冲溶液的pH,如果是碱性蛋白质,建议使用涂层毛细管.
七窍通了六窍
2楼2008-07-11 15:35:09
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