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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 求助毛细管电泳研究药物与蛋白相互作用遇到的一些问题
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penguin1228

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助毛细管电泳研究药物与蛋白相互作用遇到的一些问题

我是用毛细管电泳紫外检测研究药物与蛋白相互作用，遇到了一些问题，十分郁闷，现在处在崩溃的边缘，希望有好心人能够帮我解答一下，十分感谢
1.重现性不好，特别是把蛋白作为缓冲溶液添加剂的时候，药物的峰差异不大与标记物的迁移时间差值不重现
2.蛋白和药物的淌度差异不明显的话，是不是意味着蛋白或药物与结合物的淌度差也很小，这样的话是不是不满足淌度迁移法的条件？
3.如何判断淌度迁移法适不适用于某种药物和蛋白的相互作用研究？
4.前沿分析法中，配制不同浓度比的药物和蛋白，浓度该如何选择？

[ Last edited by penguin1228 on 2008-7-11 at 15:31 ]
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1楼 2008-07-11 14:36:32
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通
★
dnp(金币+1,VIP+0):谢谢，请继续关注讨论^_^
你用的是什么毛细管，如果用裸管，蛋白质将会与毛细管内壁发生严重的吸附作用,从而导致信号峰的迁移时间和峰面积重现性变差.建议你使用涂层毛细管进行电泳,来消除这种吸附作用.
个人认为,如果你研究的蛋白质为酸性蛋白质,可以适当增大电泳缓冲溶液的pH,如果是碱性蛋白质,建议使用涂层毛细管.
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七窍通了六窍
2楼2008-07-11 15:35:09
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penguin1228

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by platto at 2008-7-11 15:35:
你用的是什么毛细管，如果用裸管，蛋白质将会与毛细管内壁发生严重的吸附作用,从而导致信号峰的迁移时间和峰面积重现性变差.建议你使用涂层毛细管进行电泳,来消除这种吸附作用.
个人认为,如果你研究的蛋白质为酸 ...

但是文献中通常是用非涂层柱来做的，线性很好啊，缓冲液pH值是7-8之间，另外个人认为涂层柱的重现性更不好...
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3楼2008-07-11 15:58:37
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