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xiongwell

银虫 (小有名气)

[交流] 色谱峰宽的问题

最近做一个药物的分析,样品为末端吸收,色谱条件如下:
色谱柱:C18(4.6mm×250 mm,5μm)
柱温:50℃,
流动相:0.1%磷酸:乙腈=30:70,
流速:1 ml/min
检测波长:215 nm
样品浓度在200ug/ml时,精密度很好(RSD=0.5%),样品浓度在200ug/ml时,精密度很好(RSD=0.5%),样品浓度在40ug/ml时,精密度稍差(RSD=1.6%),样品浓度在10ug/ml时,精密度很差(RSD=3.2%),而我必须要做10ug/ml左右浓度的检测,请问怎么提高精密度呢。
我的色谱峰比较宽(进样量多和少,峰低宽都差不多),换过几根柱子、也试过几种不同的流动相系统,都是没有改变。理论塔板数很低(很多文献报道也只有1000多),在200ug/ml时为1400,而在10ug/ml时为0。
有人建议我用C8的柱子,或者3um填料的柱子可能会好一些,由于手里暂时没有这样的柱子,买的话又不知道到底有没有效果,请各位高手给点建议。
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zhaojunji06

铜虫 (小有名气)

根据待测样品的性质,可选用灵敏度高的检测器.
2楼2008-07-11 12:25:41
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