24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 555  |  回复: 5
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)

[交流] 为什么我的RT-PCR老是扩不到目的条带

请教大家,我做植物基因的反转录PCR,总RNA提出来后做cDNA第一链反应,再接着做PCR,用特异引物扩增一直是弥散,改用Poly T后又扩不到我要的目的条带,甚是着急,请高手指点了,谢谢:)
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)

我用QIAGEN来提取总RNA,用invitrogen的SuperScript 111 First-Strand System for RT-PCR做CDNA第一链反应,后面就是普通PCR反应,不知道会有啥问题
6楼2008-07-11 14:55:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
1、引物浓度降低点
2、设计的引物要排除基因组DNA的干扰,因此是跨内含子设计。
3、是不是胶的浓度太低了?跑出来的条带就容易散掉。缓冲液不新鲜也会这样子的,配出来的胶和电泳液就不大ok~
2楼2008-07-11 00:32:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mikezhuang

木虫 (著名写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
条带弥散,1,引物的特异性不强
              2,提高退火温度
RNA的质量如何:它是根本。
3楼2008-07-11 09:26:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chuyinghao

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
1 检查一下你的试剂盒的问题,是什么牌子的,牌子不好效果可能不好,是否过期!
2 RNA电泳是否为三条带!比例如何?是否28S为18S的2倍!RNA是否降解??
4楼2008-07-11 09:43:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291求调剂 +7 孅華 2026-03-22 7/350 2026-03-28 04:02 by fmesaito
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
[考研] 085602 307分 求调剂 +6 不知道叫什么! 2026-03-26 6/300 2026-03-27 22:00 by 催化大白
[考研] 张芳铭-中国农业大学-环境工程专硕-298 +3 手机用户 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:39 by lbsjt
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +10 幸运的酱酱 2026-03-22 12/600 2026-03-27 16:08 by muchong357
[考研] 化学308分求调剂 +8 你好明天你好 2026-03-23 9/450 2026-03-27 14:01 by 杨光于青云
[考研] 085600材料与化工306 +10 z1z2z3879 2026-03-21 11/550 2026-03-27 11:31 by wangjy2002
[考研] 315调剂 +4 0860求调剂 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:23 by wangjy2002
[考研] 317求调剂 +7 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 7/350 2026-03-27 02:29 by fmesaito
[考研] 325求调剂 +5 李嘉图·S·路 2026-03-23 5/250 2026-03-27 00:42 by wxiongid
[考研] 341求调剂 +7 青柠檬1 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:19 by wxiongid
[考研] 071000生物学求调剂,初试成绩343 +6 小小甜面团 2026-03-25 6/300 2026-03-26 23:01 by 不吃魚的貓
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料,材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 8/400 2026-03-26 20:34 by Higraduate
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 289求调剂 +17 硕星赴 2026-03-23 17/850 2026-03-26 16:18 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 289材料与化工(085600)B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
信息提示
请填处理意见