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瑶瑶27

银虫 (小有名气)

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[求助] 求DH10bac菌株！！！已有3人参与

哪位大神知道有木有地方可以购买或者可以要到DH10bac的菌株（非感受态细胞）啊~！购买回来的感受态效果都不好~想要自己做一些~可是实验室木有保留的菌株啊~！跪求啊~！

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求助昆虫杆状病毒表达载体已经有6人回复

1楼 2015-04-28 09:24:01

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

ksws0465326

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

6楼: Originally posted by 瑶瑶27 at 2015-04-29 17:26:12
恩，是要做这个，可是我也是刚刚上手~知道的也不多~...

是吗，其实是这样，我也打算做这个，而且，前期的质粒合成，以及DH10bac导入，再加上bacmid DNA回收验证都已经完成了，现在到了该导入sf9细胞这一步了，但是实验室从指导老师到研究员和师兄什么的从来都没做过，我属于摸着石头过河头一遭，细胞培养了一两次不知道因为什么第一代还能长一长，后边貌似就是污染不能传代导入bacmid了，导致前些时直接把实验室里的冻存全部用光了，老师又买了一管新的sf9 stock，我还没敢上手继续做，直接搁置了，所以我想请教一下你们实验室有没有成型的培养机制（细胞培养protocol还有实验注意事项什么的，以及培养到什么地步可以进行bacmid导入什么的）。能得到帮助的话，不胜感激！即使没有，也希望能互相讨论增进下知识技术。谢谢