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tclbw2008

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教:淋巴细胞亚群有明显差异,分泌性细胞因子却检测不出差异

请教:淋巴细胞亚群有明显差异,分泌性细胞因子却检测不出差异
****各位给看看!
小弟用A/B两种间充质干细胞与活化的(CD3,CD28刺激)T淋巴细胞共培养3天。流式细胞术发现,与T cell co-culture with A与T cell co-culture with B相比,Treg上调,Th17下调,Th1上调,Th2下调。但应用CBA试剂盒检测培养上清,测试分泌性细胞因子IL2、4、6、10、IFN-r、TNFa、IL17浓度,细胞因子都没有差异。其中上清我多说两句,既有染Treg的上清(未在检测前在培养液中加入PMA,离子霉素、BFA),也有染Th17,Th1、2的上清,其中添加过PMA,离子霉素、BFA;但这两种上清液测试上述分泌性细胞因子的结果完全一致,那么就不能说因为添加了PMA,离子霉素、BFA影响了实验结果,因为也有没有添加的Treg上清啊。
是什么原因造成这样的结果呢?各位战友请各抒己见!
谢谢!
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