24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 1773  |  回复: 16
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

9955

新虫 (小有名气)

[求助] DNA测序,公司结果是条带非特异是什么意思啊?已有5人参与

测的一个真菌的DNA,提DNA---PCR---电泳,
电泳出来也有条带
然后送公司测序,测倒是测出来了也有序列,它发给我的文件夹标题是---非特异性条带
是说我哪一步做错了吗?
头回做,啥也不懂
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

527219179

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

PCR产物中可能有多种核苷酸链,链的长度可能相同,所以直接测PCR产物都是不准确的。TA克隆,将产物与克隆载体连接,转入大肠杆菌,提取质粒、测序,可以得到单一目的条带(因为每个质粒只能结合一条DNA链)。
17楼2015-05-04 12:16:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

9955

新虫 (小有名气)

3楼2015-04-27 09:51:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

li245824369

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
9955: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-04-27 11:07:21
你是连接到载体测序么,还是产物直接测序,如果产物直接测序应该胶回收纯化再送去结果会准的!
4楼2015-04-27 10:08:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

9955

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by li245824369 at 2015-04-27 10:08:13
你是连接到载体测序么,还是产物直接测序,如果产物直接测序应该胶回收纯化再送去结果会准的!

是产物直接测序的
DNA  家了引物直接PCR,我看别人说出现非特异条带都说除了本来的一条再有的是非特异性条带,
我PCR完了电泳就一个条带,那说明这个条带就是非特异性的吗?
是我做PCR没做好吗?
5楼2015-04-27 11:06:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见