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汉一十三

新虫 (初入文坛)

[求助] WB的caspase-3做了5个月仍未做出cleaved!!!! 已有2人参与

尊敬的虫友们,小妹做了5个月的caspase-3,均未见cleaved条带,仅第一次做的时候有过。
SDS-PAGE胶15%,湿转,转膜25min,80v,200MA,抗体换了三次,最后一次是CST,但我觉得似乎有做出来,只是17kd的条带跑散开了,不知道是什么原因!
图片是倒起的, http://\"WB的caspase-3做了5个月仍未做出cleaved!!!!\"
从下面数的第二根是34KD,而图片上面看到的模糊的一片白就是17KD,空白的下面并没有
用丽春红染膜后也是模糊的一坨红色,并不是一根条带
有没有长期在做的大虾,求指点!WB的caspase-3做了5个月仍未做出cleaved!!!!-1
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hustwwjfda

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
汉一十三: 金币+1, 我想问的是为什么我的带花了,和转膜时间没有关系 2015-04-25 12:48:06
转膜时间是不是短了点?WB条件要严格遵守操作参数要求,呵呵,祝好运
2楼2015-04-25 10:36:32
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汉一十三

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hustwwjfda at 2015-04-25 10:36:32
转膜时间是不是短了点?WB条件要严格遵守操作参数要求,呵呵,祝好运

额,应该不会吧,我师兄就是这样做的,发的10分SCI
3楼2015-04-25 12:46:20
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yuqing_guo

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
汉一十三: 金币+1, ★有帮助 2015-04-29 19:25:11
抗体是否有问题?或所选抗体不对?
4楼2015-04-25 16:36:56
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汉一十三

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yuqing_guo at 2015-04-25 16:36:56
抗体是否有问题?或所选抗体不对?

CST的
5楼2015-04-29 19:24:56
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546613339

新虫 (初入文坛)

麻烦问一下,最后Cleaved Caspase 3做出来了吗?如果出结果了,能告诉我实验条件是什么吗?我也是做了好几个月了,都快疯了
6楼2015-05-19 08:04:13
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