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汉一十三

新虫 (初入文坛)

[求助] WB的caspase-3做了5个月仍未做出cleaved!!!! 已有2人参与

尊敬的虫友们，小妹做了5个月的caspase-3，均未见cleaved条带，仅第一次做的时候有过。
SDS-PAGE胶15%，湿转，转膜25min，80v，200MA，抗体换了三次，最后一次是CST，但我觉得似乎有做出来，只是17kd的条带跑散开了，不知道是什么原因！
图片是倒起的， http://\"WB的caspase-3做了5个月仍未做出cleaved!!!!\"
从下面数的第二根是34KD，而图片上面看到的模糊的一片白就是17KD，空白的下面并没有
用丽春红染膜后也是模糊的一坨红色，并不是一根条带
有没有长期在做的大虾，求指点！WB的caspase-3做了5个月仍未做出cleaved!!!!-1
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1楼 2015-04-24 17:03:18
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hustwwjfda

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
汉一十三: 金币+1, 我想问的是为什么我的带花了，和转膜时间没有关系 2015-04-25 12:48:06
转膜时间是不是短了点？WB条件要严格遵守操作参数要求，呵呵，祝好运
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2楼2015-04-25 10:36:32
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汉一十三

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hustwwjfda at 2015-04-25 10:36:32
转膜时间是不是短了点？WB条件要严格遵守操作参数要求，呵呵，祝好运

额，应该不会吧，我师兄就是这样做的，发的10分SCI
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3楼2015-04-25 12:46:20
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yuqing_guo

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
汉一十三: 金币+1, ★有帮助 2015-04-29 19:25:11
抗体是否有问题？或所选抗体不对？
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4楼2015-04-25 16:36:56
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汉一十三

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yuqing_guo at 2015-04-25 16:36:56
抗体是否有问题？或所选抗体不对？

CST的
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5楼2015-04-29 19:24:56
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546613339

新虫 (初入文坛)
麻烦问一下，最后Cleaved Caspase 3做出来了吗？如果出结果了，能告诉我实验条件是什么吗？我也是做了好几个月了，都快疯了
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6楼2015-05-19 08:04:13
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