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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 请试验过蛋白分离纯化的同胞和大神进来看看
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hbk0228

银虫 (初入文坛)

[求助] 请试验过蛋白分离纯化的同胞和大神进来看看 已有3人参与

我现在想分离纯化蛋白获取多肽，多肽分子量一般在100KD至几百D不等。我实验目的是只需要将不同分子量段的多肽分離開得到几个不同分子量段的多肽混合物就行，不需要特定分子量段，如500-3000、5000-15000、30000-60000都行。
但实验室条件所限，没有排阻色谱、层析柱之类的设备（而且此类设备效率低，费时费力）。
网上搜寻过超滤离心管（截留量最小3KD，截留效率也较低）、透析袋（截留分子量3500、7000、8000-14000不等），请问有什么比较经济适用的方法让我能完成实验？
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1楼 2015-04-23 16:34:52
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MHSW

禁言 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
7楼2015-09-23 09:14:26
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scuzwc

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
hbk0228(99503102代发): 金币+1, 谢谢应助，请继续为其他虫友解答噢！ 2015-09-24 16:48:11
首先要确定你需要的目标产物的量；其次根据实验目的才能有的放矢的选择分离纯化的方法。
大量：透析或者层析柱
微量：超滤或者层析柱
PS：蛋白质纯化怎么可能有你想象的“又快又好”的方法呢，你的出发点就错了~天然产物的分离纯化本来就是一个漫长的过程，同学，天道酬勤！
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fooder
2楼2015-04-23 20:58:50
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hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
hbk0228(99503102代发): 金币+1, 谢谢应助！区长辛苦！ 2015-09-24 16:48:27
目测楼主是要开启懒人模式，但是蛋白纯化懒不得
最省事的办法还是超滤或者离心
超滤设备可以3K 1W 3W 5W 10W分子量截留
超滤离心杯也有以上规格
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太胖了！~
3楼2015-04-23 22:04:46
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hbk0228

银虫 (初入文坛)
真心不是懒，如果有条件慢慢做就是了。巧妇难为无米之炊嘛~
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4楼2015-04-24 08:56:29
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