应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 做的TA克隆，一直连不上
172/2返回列表上一页12
查看: 1812  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

NSDSKY_LZM

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 393658000 at 2015-04-27 14:42:18
你用的什么酶做PCR

takara的2×Taq master Mix
赞一下 回复此楼
11楼2015-04-27 16:24:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

横卧沙丘

新虫 (初入文坛)
DNA纯度高吗

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
12楼2015-04-27 16:50:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxlijian

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果实在做不出来，建议换无缝克隆技术构建重组质粒！效率高，速度快！就是价格贵点！

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
13楼2015-04-27 16:58:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

NSDSKY_LZM

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 横卧沙丘 at 2015-04-27 16:50:07
DNA纯度高吗

你说的是260/280吧，在1.7几左右
赞一下 回复此楼
14楼2015-04-27 17:11:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

393658000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by NSDSKY_LZM at 2015-04-27 16:24:17
takara的2×Taq master Mix...

PCR带A了，没理由TA克隆做不上去了，个人建议，换个平端载体，PCR平末端连接

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
15楼2015-04-28 00:15:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qaz139687

新虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 393658000 at 2015-04-28 00:15:08
PCR带A了，没理由TA克隆做不上去了，个人建议，换个平端载体，PCR平末端连接
...

请问一下我一直都是这样做的，但是有个问题，每次连接转化之后，先用没有氨苄的培养基摇菌培养1小时，然后离线去掉上清，涂平板，蓝白斑筛选，37摄氏度培养16小时候，放冰箱N小时后，总是没有蓝的这是为啥？还有挑菌后，用氨苄培养基摇菌，为什么我的菌液老是沉在底部，都不是浑浊的，而且量很难变多，能不能上传一张涂平板后的图片给我看看是着么样的，谢谢
赞一下 回复此楼
16楼2015-04-29 09:28:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

91candy

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

solutionI 5ul       这个是什么？我一直都是加基因和载体，不加别的了。

载体和基因有一个最佳反应摩尔比，不知道你考虑没有。
赞一下 回复此楼
17楼2015-08-26 15:44:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 NSDSKY_LZM 的主题更新
172/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 299求调剂 +4 15188958825 2026-03-25 4/200 2026-03-25 22:56 by 418490947
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 3/150 2026-03-25 21:13 by 给你你注意休息
[考研] 机械学硕总分317求调剂！！！！ +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 311求调剂 +4 勇敢的小吴 2026-03-20 4/200 2026-03-25 18:12 by xcjcqu
[考研] 296求调剂 +4 汪！？！ 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪！？！
[考研] 【2026考研调剂】制药工程 284分 求相关专业调剂名额 +4 袁奂奂 2026-03-25 8/400 2026-03-25 14:32 by lbsjt
[考研] 085602 289分求调剂 +7 WWW西西弗斯 2026-03-24 7/350 2026-03-25 14:28 by 3Strings
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +6 NIFFFfff 2026-03-20 6/300 2026-03-24 21:02 by hello七七
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +5 谷雨上岸 2026-03-23 6/300 2026-03-24 16:32 by laoshidan
[考研] 材料/农业专业，07/08开头均可，过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪！？！
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 352求调剂 +3 大米饭！ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123！
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭