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zealoushebe

木虫 (初入文坛)

[求助] DiKMA钻石柱柱压太高,怎么办? 已有2人参与

迪马钻石C18柱,流动相乙腈-1%乙酸水(97:3),乙腈色谱纯没过滤,乙酸水分析纯已过滤。
样品用二氯甲烷提取后过0.45微孔滤膜。
之前的一根柱子进样比较久,到最后直接单峰变成双峰,柱压也没有变到250以上。
这根迪马的柱刚进样;一周多就从85柱压升到现在300警报。现在用纯乙腈1.0的流速冲,柱压在240上下,一会儿210左右,一会儿又升高
求助各位大神,我该怎样冲柱子把里面冲干净,用异丙醇或四氢呋喃行不行?应该是个什么比例,怎么个梯度,麻烦详细的告诉我,这是我第一次独立做液相,有很多不懂的地方。
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呀呀好傻

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zealoushebe: 金币+50, ★有帮助 2015-04-21 19:58:18
用乙腈:水=1:1 洗1到2个小时看看
或者流速变味0.5ml/min过夜洗
父母在人生尚有来处父母走人生只剩归途
2楼2015-04-15 14:07:10
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zealoushebe

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 呀呀好傻 at 2015-04-15 14:07:10
用乙腈:水=1:1 洗1到2个小时看看
或者流速变味0.5ml/min过夜洗

40的乙腈:60的乙酸水冲,柱压超过300报警了,1:1的比例冲是不是很伤柱子?

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-04-15 14:15:14
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呀呀好傻

金虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zealoushebe at 2015-04-15 14:15:14
40的乙腈:60的乙酸水冲,柱压超过300报警了,1:1的比例冲是不是很伤柱子?
...

就是用纯乙腈与纯水以1:1的洗 不是乙酸水
父母在人生尚有来处父母走人生只剩归途
4楼2015-04-15 14:37:04
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zealoushebe

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 呀呀好傻 at 2015-04-15 14:37:04
就是用纯乙腈与纯水以1:1的洗 不是乙酸水...

我的意思是如果1:1冲可能柱压会超,是要把流速降下来么?担心里面有一些不溶性的杂质,如果用2%四氢呋喃水和乙腈配比冲会不会好一些?这样对柱子会不会有损伤?
5楼2015-04-15 16:12:02
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议你建个梯度洗脱方法,从水相占90%一直到有机相占90%过渡着洗洗,意思是用不同极性的溶剂将柱子中不同极性的脏东西洗脱出来!
gwmgyp
6楼2015-04-17 08:58:05
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zealoushebe

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by gwmgyp at 2015-04-17 08:58:05
建议你建个梯度洗脱方法,从水相占90%一直到有机相占90%过渡着洗洗,意思是用不同极性的溶剂将柱子中不同极性的脏东西洗脱出来!

之前就是这么洗的,柱压依旧很高,因为制样是用的二氯甲烷,怀疑有塑料溶进柱子了,进了几针纯的二氯甲烷之后冲出来柱压就降了,柱效还蛮高的,谢谢您的帮助啦

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2015-04-21 20:00:49
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

引用回帖:
7楼: Originally posted by zealoushebe at 2015-04-21 20:00:49
之前就是这么洗的,柱压依旧很高,因为制样是用的二氯甲烷,怀疑有塑料溶进柱子了,进了几针纯的二氯甲烷之后冲出来柱压就降了,柱效还蛮高的,谢谢您的帮助啦
...

看来还是亲自做样的人了解情况!
gwmgyp
8楼2015-04-22 11:06:19
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