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关于体外肿瘤3d模型的建立 已有2人参与
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本人现在在作关于肺癌细胞A549的实验，想建立一个体外的3d肿瘤细胞球，按照文献上做了很多实验，依然无法做出来。 主要尝试了是两种方法，一种是选用低熔点琼脂糖和培养基混合后（2%的琼脂糖），加热到80℃混匀后，冷却到室温左右加入细胞和培养基与96孔圆底培养版（U底)再1500转离心10min。结果发现细胞并没有很好的聚在一起，很不规则的分散状态，没有文献中图片那样很规则的球状，而且感觉细胞不再生长，并没有明显的增值。想问问大家其中是不是有什么技巧，还是A549这种细胞就不太适合做肿瘤球（关于A549查到的文献确实较少）。 还有一种方法就是直接在圆底96孔板中离心细胞，没有加入琼脂糖，结果显示细胞都在孔底，且是圆形的，但是面积很大，在共聚焦上不易于观察。 求助做过肿瘤球的大神或者有这方面经验的人。 |
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 3d细胞模型建立 |
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bigbang_0_0
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【答案】应助回帖
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2876x: 金币+10, ★有帮助 2015-06-10 14:36:07
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你好，matrigel厚层成胶凝固后种细胞，球长在表面，但会有一些新生的微血管会深入到胶里面，换培养液的时候不必担心被吸走或破裂，动作轻一点就行，pubmed搜Takanori Takebe，另外，我不清楚你们构建3D球球的目的？是要做药筛吗还是只是拍个照片，测个体积（一般都是在24h以内完成）啥的？如果是前者，或者你需要长期培养，你要考虑肿瘤细胞和HUVEC本身的增殖会导致球的破裂，需要先摸索一下HUVEC、MSC和功能细胞的共培养比例，因为只有在特定的比例范围内，球才不易破裂 |
6楼2015-06-08 13:55:04
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