应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药剂学 » 关于体外肿瘤3d模型的建立
91/1返回列表
查看: 2762  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

2876x

金虫 (小有名气)

[求助] 关于体外肿瘤3d模型的建立 已有2人参与

本人现在在作关于肺癌细胞A549的实验，想建立一个体外的3d肿瘤细胞球，按照文献上做了很多实验，依然无法做出来。
主要尝试了是两种方法，一种是选用低熔点琼脂糖和培养基混合后（2%的琼脂糖），加热到80℃混匀后，冷却到室温左右加入细胞和培养基与96孔圆底培养版（U底)再1500转离心10min。结果发现细胞并没有很好的聚在一起，很不规则的分散状态，没有文献中图片那样很规则的球状，而且感觉细胞不再生长，并没有明显的增值。想问问大家其中是不是有什么技巧，还是A549这种细胞就不太适合做肿瘤球（关于A549查到的文献确实较少）。
还有一种方法就是直接在圆底96孔板中离心细胞，没有加入琼脂糖，结果显示细胞都在孔底，且是圆形的，但是面积很大，在共聚焦上不易于观察。
求助做过肿瘤球的大神或者有这方面经验的人。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

3d细胞模型建立

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-04-13 15:29:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冯又又

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以用胶原水凝胶或者matrigel包埋哦
赞一下 回复此楼
2楼2015-04-22 09:31:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2876x

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 冯又又 at 2015-04-22 09:31:46
可以用胶原水凝胶或者matrigel包埋哦

你好，能否详细一点，提供一些文献参考
赞一下 回复此楼
3楼2015-04-25 15:17:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigbang_0_0

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

试一下悬滴培养板；
另外，我们做血管化肝脏3D培养时，先取 60ul/well matrigel （>10mg/ml）加入到96孔板中凝固成胶，后接种16X10^4个肝细胞（或肝母细胞）、11.2X10^4个HUVEC和3.2X10^4个间充质干细胞，24h即可在凝胶表面形成spheroid。
赞一下 回复此楼
4楼2015-05-18 13:01:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2876x

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by bigbang_0_0 at 2015-05-18 13:01:16
试一下悬滴培养板；
另外，我们做血管化肝脏3D培养时，先取 60ul/well matrigel （>10mg/ml）加入到96孔板中凝固成胶，后接种16X10^4个肝细胞（或肝母细胞）、11.2X10^4个HUVEC和3.2X10^4个间充质干细胞，24h即 ...

你好，细胞在是matrigel凝固之后加入的？ 球是长在matrigel表面还是会嵌入里面，如果是在表面的话，换培养液的时候肿瘤球不会被吸走或者破裂么，你好，请问你们有类似的文献可以参考么。
赞一下 回复此楼
5楼2015-05-19 13:52:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigbang_0_0

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
2876x: 金币+10, ★有帮助 2015-06-10 14:36:07
2876x: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-06-10 14:37:22
引用回帖:
5楼: Originally posted by 2876x at 2015-05-19 13:52:17
你好，细胞在是matrigel凝固之后加入的？ 球是长在matrigel表面还是会嵌入里面，如果是在表面的话，换培养液的时候肿瘤球不会被吸走或者破裂么，你好，请问你们有类似的文献可以参考么。...

你好，matrigel厚层成胶凝固后种细胞，球长在表面，但会有一些新生的微血管会深入到胶里面，换培养液的时候不必担心被吸走或破裂，动作轻一点就行，pubmed搜Takanori Takebe，另外，我不清楚你们构建3D球球的目的？是要做药筛吗还是只是拍个照片，测个体积（一般都是在24h以内完成）啥的？如果是前者，或者你需要长期培养，你要考虑肿瘤细胞和HUVEC本身的增殖会导致球的破裂，需要先摸索一下HUVEC、MSC和功能细胞的共培养比例，因为只有在特定的比例范围内，球才不易破裂
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2015-06-08 13:55:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2876x

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by bigbang_0_0 at 2015-06-08 13:55:04
你好，matrigel厚层成胶凝固后种细胞，球长在表面，但会有一些新生的微血管会深入到胶里面，换培养液的时候不必担心被吸走或破裂，动作轻一点就行，pubmed搜Takanori Takebe，另外，我不清楚你们构建3D球球的目的？ ...

首先谢谢你，我是做药剂的，做肿瘤球是为了体外探测剂型对于肿瘤内部的穿透性，如果成球快的话可以在24h内做完实验。请问是要将肿瘤细胞和HUVEC细胞混合加入么，他们会在matrigel上自聚集成球？不需要的外力（如离心的作用么）？
赞一下 回复此楼
7楼2015-06-10 14:35:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigbang_0_0

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 2876x at 2015-06-10 14:35:54
首先谢谢你，我是做药剂的，做肿瘤球是为了体外探测剂型对于肿瘤内部的穿透性，如果成球快的话可以在24h内做完实验。请问是要将肿瘤细胞和HUVEC细胞混合加入么，他们会在matrigel上自聚集成球？不需要的外力（如离 ...

自聚集是不需要外力的，细胞会自动迁移聚集的，HUVEC是用来成血管的，MSC 则是成球所必需的，需要将HUVEC、MSC和肿瘤细胞混合加入
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2015-06-11 19:42:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xmcykf888

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
9楼2017-06-05 16:47:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 2876x 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +3 kongweilin 2026-03-26 3/150 2026-03-26 00:53 by 15723253818
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +14 tcxiaoxx 2026-03-20 16/800 2026-03-25 23:14 by peike
[考研] 08工学调剂 +13 用户573181 2026-03-20 18/900 2026-03-25 22:00 by zbssa
[考研] 086000生物与医药292求调剂 +4 小小陈小小 2026-03-22 7/350 2026-03-25 19:07 by 星空星月
[考研] 303求调剂 +6 元夕元 2026-03-20 7/350 2026-03-25 12:00 by edmund7
[考研] 求调剂323材料与化工 +4 1124361 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:19 by shulmg
[考研] 0854 考研调剂 招生了！AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 材料/农业专业，07/08开头均可，过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪！？！
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪！？！
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭