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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教高手关于提取RNA的问题
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sunny1826

木虫 (小有名气)

[交流] 请教高手关于提取RNA的问题

各位高手，请问一下提取12孔板1个孔内细胞的RNA，用0.5ml的trizol是否够了？感觉自己提出来比较少，不知道是不是trizol不够？烦请高手多多指教，谢谢了！
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相信自己！
1楼 2008-06-30 22:21:35
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yangym1123

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
我个人认为是足够了：因为 50-100mg组织/1mlTrizol； 5×106 细胞（10的六次方个细胞）/1mlTrizol ，所以你也可以进行一下细胞数目的估计！
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2楼2008-07-07 21:20:14
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weidong3.14

木虫 (正式写手)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
是什么细胞？RNA的浓度是多少？

如果认为浓度太低的话，可以在沉淀的时候加点糖原，在-20oC或-80oC冰箱里放30分钟再离心。
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仰天大笑出门去，我辈岂是蓬蒿人
3楼2008-07-08 07:44:10
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
12孔板……呃，我一般都至少用小皿提
不然感觉确实提出来会有点少~~
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4楼2008-07-08 10:35:57
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seahow

木虫 (著名写手)
同意二楼。
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5楼2008-07-12 20:33:18
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xyklmu

至尊木虫 (知名作家)

虫眼看世界
同意二楼的说法，trizol的量肯定是足够的。
至于RNA的得率较低的原因估计跟细胞的数量和种类有关，按说细胞的RNA相对组织而言是容易提取的。
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位卑未敢忘忧国。
6楼2008-07-14 20:59:14
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playboy723

金虫 (正式写手)
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
一般来说0.5ml的trizol肯定是够了   但你的细胞状态好吗    提取过程中要小心不要降解   另外你要用RNA做什么  普通的RT-PCR12孔板的一个孔细胞量足矣了   其他的没做过   但也应该够了的   我们这儿的高人踢过24孔板的RNA一样够用了啊   你可以在逆转录时多弄几管啊
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7楼2008-08-19 15:39:13
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