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sunny1826

木虫 (小有名气)

[交流] 请教高手关于提取RNA的问题

各位高手,请问一下提取12孔板1个孔内细胞的RNA,用0.5ml的trizol是否够了?感觉自己提出来比较少,不知道是不是trizol不够?烦请高手多多指教,谢谢了!
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相信自己!
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yangym1123

木虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
我个人认为是足够了:因为 50-100mg组织/1mlTrizol; 5×106 细胞(10的六次方个细胞)/1mlTrizol ,所以你也可以进行一下细胞数目的估计!
2楼2008-07-07 21:20:14
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weidong3.14

木虫 (正式写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
是什么细胞?RNA的浓度是多少?

如果认为浓度太低的话,可以在沉淀的时候加点糖原,在-20oC或-80oC冰箱里放30分钟再离心。
仰天大笑出门去,我辈岂是蓬蒿人
3楼2008-07-08 07:44:10
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
12孔板……呃,我一般都至少用小皿提
不然感觉确实提出来会有点少~~
4楼2008-07-08 10:35:57
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seahow

木虫 (著名写手)

同意二楼。
5楼2008-07-12 20:33:18
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xyklmu

至尊木虫 (知名作家)

虫眼看世界

同意二楼的说法,trizol的量肯定是足够的。
至于RNA的得率较低的原因估计跟细胞的数量和种类有关,按说细胞的RNA相对组织而言是容易提取的。
位卑未敢忘忧国。
6楼2008-07-14 20:59:14
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playboy723

金虫 (正式写手)

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
一般来说0.5ml的trizol肯定是够了   但你的细胞状态好吗    提取过程中要小心不要降解   另外你要用RNA做什么  普通的RT-PCR12孔板的一个孔细胞量足矣了   其他的没做过   但也应该够了的   我们这儿的高人踢过24孔板的RNA一样够用了啊   你可以在逆转录时多弄几管啊
7楼2008-08-19 15:39:13
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