请教普通PCR问题 - 分子生物 - PCR相关 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

11楼2015-04-02 11:37:26

王欣龙0817

12楼2015-04-02 13:11:42

不问来路

银虫 (正式写手)

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-04-02 23:36:49

这应该是非特异性扩增吧，我做梯度一般是正负5度，也就是10度的跨度来做。

13楼2015-04-02 16:12:20

mzhyan

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blessing

14楼2015-04-02 16:20:39

yangyang1991

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有杂带，i引物的问题了

15楼2015-04-02 18:43:18

470642365mm

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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-04-02 23:37:05

杂带多，①可以先提高退火温度试试，比如60℃；②还可能是引物特异性差，可以重新设计引物；③还有就是模板质量问题了。楼主可以根据自己PCR产物的分子量大小（根据marker判断）是否正确啊

16楼2015-04-02 21:42:41

hehanhan

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引用回帖:

16楼: Originally posted by 470642365mm at 2015-04-02 21:42:41
杂带多，①可以先提高退火温度试试，比如60℃；②还可能是引物特异性差，可以重新设计引物；③还有就是模板质量问题了。楼主可以根据自己PCR产物的分子量大小（根据marker判断）是否正确啊

分子量基本是正常的，就是杂带比较多的，我的体系需要修改么，谢谢

17楼2015-04-02 22:00:38