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shishen234

新虫 (初入文坛)

[求助] WB胶片前后两次结果相反?!

各位虫友大家好,想跟大家求助一点小问题:
  最近在进行WB的时候,目的是想要验证正常细胞和肿瘤细胞中X蛋白的表达量差异,但是曝光的时候却总出现截然相反的结果,
  具体就是压片子的时候,刚加上HRP发光液的时候,可以看到明显的条带,然后就压片子曝光,然后第一次洗完胶片之后,可能曝光的时候显影长一点或者是结果不是很理想,就再压一次(一般都会多压几次找一张最好的),这时候可以看到明显的荧光有部分淬灭的现象,但是还是有光的,但是压完了之后,却发现第一次和第二次的结果截然相反,问题是好几次都是这样,很困惑啊!
  我自己理解是不是不同的条带有不同的荧光淬灭速率,所以第一次的胶片和第二次的胶片不同?不知道大家有没有这种现象,该怎么理解,有没有WB大神来教教我啊,谢谢各位亲啦~~
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