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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 关于PCR的问题。
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bbqlhb

木虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-03-30 13:46:35
恩恩，那就差不多了，普通的Taq DNA聚合酶不会有15min的，但是我们一般使用的热启动聚合酶预变性10min就能激活酶的活性了，15min时间还挺长的，你用的是热启动酶名字是啥？...

我不是楼主。。- -！
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11楼2015-03-30 15:10:00
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
引用回帖:
11楼: Originally posted by bbqlhb at 2015-03-30 15:10:00
我不是楼主。。- -！...

呵呵 ，没事啊，交流吗
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
12楼2015-03-30 17:35:09
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矜天

木虫 (正式写手)
是不是直接菌体PCR，预变性时间长
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13楼2015-03-30 18:32:11
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babybluecj

新虫 (初入文坛)
★
洛可可薇薇(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-03-30 20:49:55
引用回帖:
6楼: Originally posted by 洛可可薇薇 at 2015-03-30 08:33:15
那再请问下，为啥作者要单独提出来这个1分30秒呢？为啥不说延伸时间是11分30秒......

因为那个1分30秒是循环中的延伸。这个第二步到第四步是要重复35次的。
35次循环之后，还要再进行一次10分钟的延伸。
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14楼2015-03-30 20:08:03
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洛可可薇薇

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-03-30 08:57:51
你看的这啥文献啊？预变性15min？没有这么长时间，最多3min不得了啦，不要用15min
延伸分为两步 延伸和终延伸。延伸，是以你加入的primer为引物从5‘--->3'合成DNA的互补链, 在循环结束后一般要终止延伸8-10min ...

噢，那1分30秒死延伸，后面10分钟是终延伸。
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15楼2015-04-04 14:39:43
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Longnil

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 洛可可薇薇 at 2015-03-30 08:33:15
那再请问下，为啥作者要单独提出来这个1分30秒呢？为啥不说延伸时间是11分30秒......

最后72℃ 延伸10分钟有利于体系的最终稳定和最终产物的充分延伸
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lifeisbeautiful
16楼2015-04-23 07:29:24
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