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waterrainbow

金虫 (小有名气)

[求助] 有木有做RACE的高人呀,求教 已有2人参与

最近一直在做E.coli中一个基因的5‘ RACE,clontech的试剂盒,老贵了,奈何试了3次都未扩出全长,惶恐啊,个人觉得是RNA质量不大好,所以想请教下高手们,提完RNA后可以不用DNase消化么,尽量减少RNA的损失
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waterrainbow

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 我欲乘风归去 at 2015-04-02 09:03:17
RACE都是用试剂盒,真有钱。我们都是自己用土方法做的。trizol提取液里面含有DNA酶,takara的RNAiso貌似也可以

自己合成接头引物么,方便的话,麻烦不吝赐教
Alwaysbegrateful...
11楼2015-04-02 15:23:18
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-03-29 23:13:52
既然是大肠杆菌,何不直接查基因组数据得了,再不行就在基因组上整个walking,从RNA入手有点。。。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-03-26 19:01:42
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waterrainbow

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-03-26 19:01:42
既然是大肠杆菌,何不直接查基因组数据得了,再不行就在基因组上整个walking,从RNA入手有点。。。

新研究一条通路,想确定这条通路对某个基因的调控作用,查找对应的转录起始位点,所以就RACE扩增下5'端
Alwaysbegrateful...
3楼2015-03-26 20:38:53
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dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

是的,做调控是必须找出转录其实位点,最近也打算做,所以没什么经验,坐等高手,顺便问问那个kit多少钱?
科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
4楼2015-03-27 08:02:38
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