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求交流:细胞裂解液 或胰蛋白酶液中加EDTA的作用?
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求交流:细胞裂解液 或胰蛋白酶液中加EDTA的作用?
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查的资料 说细胞裂解液中加入EDTA 螯合金属离子,可使金属蛋白酶失活,抑制蛋白的降解。
但消化细胞时,常在胰蛋白酶中加EDTA, 可加速细胞消化。但胰蛋白酶也是钙离子金属蛋白酶,加入EDTA为什么不会影响?
另外百度对胰蛋白酶的介绍中,提到“。。。Ca2+对酶活性有稳定作用;..." 但下文又提到“因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白质可降低胰酶的活性。。。,”。这不前后矛盾吗?
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2015-03-26 13:14:31
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流
2015-03-26 22:31:54
细胞贴壁发挥作用的蛋白需要Ca2+、Mg2+等离子,加入EDTA对金属阳离子进行螯合有利于细胞的消化。
关于胰酶,应该也是Ca2+、Mg2+的存在抑制其酶活
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2015-03-26 15:58:50
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2楼
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0620602
at 2015-03-26 15:58:50
细胞贴壁发挥作用的蛋白需要Ca2+、Mg2+等离子,加入EDTA对金属阳离子进行螯合有利于细胞的消化。
关于胰酶,应该也是Ca2+、Mg2+的存在抑制其酶活
网上说Ca2+、Mg2+抑制胰蛋白酶。但是胰蛋白酶也是钙离子蛋白酶,钙离子在酶分子内部,是其活性中心。 为什么游离的钙离子会抑制它的活性呢? EDTA可以螯合金属离子,不会对胰蛋白分子内的钙离子产生作用吗? 或者可能,EDTA无法螯合酶分子内部的钙离子。 但是也有介绍说其他的金属蛋白酶,其分子内的钙离子也可以被EDTA结合的。
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2015-03-26 16:54:43
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流
2015-03-28 23:32:53
EDTA是是像个手掌一样的金属螯合剂,它可以牢牢抓住金属离子。而胰蛋白酶也是可以理解为一个爪子抓住了钙离子,因此手掌无法再去抓住爪子捕获的钙离子了
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2015-03-28 17:07:19
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EDTA加的量比较少,可能是用于减少溶液中的离子,提高酶消化的活性
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2015-03-28 22:09:58
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LZ你这个问题解决了吗?能否告知下
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2015-04-22 17:21:45
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7楼
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Originally posted by
z631535213
at 2015-04-22 17:21:45
LZ你这个问题解决了吗?能否告知下
还不是很清楚其中的机制..............
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8楼
2015-06-02 16:17:51
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雪坳
at 2015-03-28 17:07:19
EDTA是是像个手掌一样的金属螯合剂,它可以牢牢抓住金属离子。而胰蛋白酶也是可以理解为一个爪子抓住了钙离子,因此手掌无法再去抓住爪子捕获的钙离子了
那做co-IP或其他实验时 细胞裂解液中加EDTA是什么作用呢?
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9楼
2015-06-02 16:23:13
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胰酶是钙离子酶,钙在其内部!外在的钙离子则会降低胰酶的活性!
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10楼
2015-10-14 02:09:32
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