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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求交流：细胞裂解液 或胰蛋白酶液中加EDTA的作用？
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89509306

银虫 (小有名气)

[交流] 求交流：细胞裂解液 或胰蛋白酶液中加EDTA的作用？ 已有5人参与

查的资料 说细胞裂解液中加入EDTA 螯合金属离子，可使金属蛋白酶失活，抑制蛋白的降解。
但消化细胞时，常在胰蛋白酶中加EDTA,  可加速细胞消化。但胰蛋白酶也是钙离子金属蛋白酶，加入EDTA为什么不会影响？

另外百度对胰蛋白酶的介绍中，提到“。。。Ca2+对酶活性有稳定作用；..." 但下文又提到“因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白质可降低胰酶的活性。。。，”。这不前后矛盾吗？
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1楼 2015-03-26 13:14:31
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0620602

铜虫 (初入文坛)
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-03-26 22:31:54
细胞贴壁发挥作用的蛋白需要Ca2+、Mg2+等离子，加入EDTA对金属阳离子进行螯合有利于细胞的消化。
关于胰酶，应该也是Ca2+、Mg2+的存在抑制其酶活
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2楼2015-03-26 15:58:50
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89509306

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 0620602 at 2015-03-26 15:58:50
细胞贴壁发挥作用的蛋白需要Ca2+、Mg2+等离子，加入EDTA对金属阳离子进行螯合有利于细胞的消化。
关于胰酶，应该也是Ca2+、Mg2+的存在抑制其酶活

网上说Ca2+、Mg2+抑制胰蛋白酶。但是胰蛋白酶也是钙离子蛋白酶，钙离子在酶分子内部，是其活性中心。 为什么游离的钙离子会抑制它的活性呢？   EDTA可以螯合金属离子，不会对胰蛋白分子内的钙离子产生作用吗？  或者可能，EDTA无法螯合酶分子内部的钙离子。 但是也有介绍说其他的金属蛋白酶，其分子内的钙离子也可以被EDTA结合的。
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3楼2015-03-26 16:54:43
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雪坳

新虫 (初入文坛)
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-03-28 23:32:53
EDTA是是像个手掌一样的金属螯合剂，它可以牢牢抓住金属离子。而胰蛋白酶也是可以理解为一个爪子抓住了钙离子，因此手掌无法再去抓住爪子捕获的钙离子了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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天道酬勤
4楼2015-03-28 17:07:19
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SAM001

金虫 (小有名气)
sh
5楼2015-03-28 22:08:43
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SAM001

金虫 (小有名气)
★
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EDTA加的量比较少，可能是用于减少溶液中的离子，提高酶消化的活性
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6楼2015-03-28 22:09:58
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z631535213

木虫 (正式写手)
★
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LZ你这个问题解决了吗？能否告知下
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7楼2015-04-22 17:21:45
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89509306

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by z631535213 at 2015-04-22 17:21:45
LZ你这个问题解决了吗？能否告知下

还不是很清楚其中的机制..............
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8楼2015-06-02 16:17:51
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89509306

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 雪坳 at 2015-03-28 17:07:19
EDTA是是像个手掌一样的金属螯合剂，它可以牢牢抓住金属离子。而胰蛋白酶也是可以理解为一个爪子抓住了钙离子，因此手掌无法再去抓住爪子捕获的钙离子了

那做co-IP或其他实验时 细胞裂解液中加EDTA是什么作用呢？
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9楼2015-06-02 16:23:13
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13170012081

新虫 (初入文坛)
★
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胰酶是钙离子酶，钙在其内部！外在的钙离子则会降低胰酶的活性！
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10楼2015-10-14 02:09:32
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