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明辨是非

银虫 (小有名气)

[交流] 细胞聚成团不贴壁是因为消化过度?

我做完流式的细胞养在24孔板里,第二天发现很多细胞飘起来在中间聚成一大团,当时觉得肯定是死掉了,毕竟流式对细胞伤害很大。后来24孔板里养的细胞长起来了但是不太均匀,于是就用100μl胰酶EDTA消化了大概5分钟然后加入900μl的含有10%血清的培养基吹打均匀。但是第二天又发现很多细胞飘起来在中间聚成一大团。细胞密度比培养液大,飘起来的应该是死的,可是死掉的细胞该一个个单独飘即来,能粘在一起说明还没死。突然想起来做流式前为了确保单细胞消化的也比较久,难道是因为消化过渡所以细胞无法贴壁?
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2楼2015-03-26 09:37:32
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3楼2015-03-26 09:57:37
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4楼2015-03-26 10:01:32
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假大空

木虫之王 (文学泰斗)

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5楼2015-03-26 10:06:34
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6楼2015-03-26 10:29:04
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conanzzz

木虫 (正式写手)

★
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你的胰酶没有去掉,也就是一直在培养液中起作用的,肯定有影响
7楼2015-03-26 13:01:46
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猫薄荷9143

新虫 (初入文坛)

★
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我最近是铺96孔板,有的孔细胞不贴壁,但是是单个细胞,本来团块也不少,是我吹打成单个的。
LZ找到原因了一定告诉我一声啊,因为这个试验都没法进行了。
8楼2015-03-26 16:23:23
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明辨是非

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 猫薄荷9143 at 2015-03-26 16:23:23
我最近是铺96孔板,有的孔细胞不贴壁,但是是单个细胞,本来团块也不少,是我吹打成单个的。
LZ找到原因了一定告诉我一声啊,因为这个试验都没法进行了。

似乎是消化过渡 飘起的细胞团我又离心收集之后再吹打 没有分成单个的但是都分成了小团 一天后再看就贴壁了 不过贴壁不结实
9楼2015-03-28 10:56:29
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