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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 载体选择
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wuwenmei

新虫 (小有名气)

[求助] 载体选择 已有4人参与

想请教个问题，老板让我利用SUMO标签构建重组载体表达抗菌肽，我开始选择的是pET-3C，实验方案写好了，老板说载体不行，不适合折叠表达，让我自己去Invotrogen查一个，各位小木虫人有没有提供一个好的载体给我呀，pET-28b怎么样呀？由于我是第一次接触这些东西不懂呀，我是参考暨大的硕士论文选的是pET-3C,哎，不懂，求助呀，，
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下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
1楼 2015-03-23 13:00:22
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ptttmt

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wuwenmei: 金币+1 2015-03-23 20:57:49
invitrogen公司的pET-SUMO载体，TA克隆法构建

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-03-23 14:39:18
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五维度的爱

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wuwenmei: 金币+1, ★有帮助 2015-03-23 20:57:43
见别人有用pET-28a载体改造的
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4楼2015-03-23 16:09:20
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普通回帖

biosci

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wuwenmei(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-03-23 19:29:06
这两个载体基本一样的，除了抗性之外，基本没区别
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2楼2015-03-23 14:35:54
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wuwenmei

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ptttmt at 2015-03-23 14:39:18
invitrogen公司的pET-SUMO载体，TA克隆法构建

这个是不是直接带了SUMO标签的载体，我直接把我的序列直接连上去不就行的还是？你有用过这个载体吗？

[ 发自小木虫客户端 ]
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下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
5楼2015-03-23 20:30:10
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小小cool

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wuwenmei at 2015-03-23 20:30:10
这个是不是直接带了SUMO标签的载体，我直接把我的序列直接连上去不就行的还是？你有用过这个载体吗？
...

我用过自己构建的sumo载体,还行

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2015-03-23 20:50:13
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wuwenmei

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ptttmt at 2015-03-23 14:39:18
invitrogen公司的pET-SUMO载体，TA克隆法构建

你们实验室有用pET-SUMO载体吗？我是不是直接把自己的目的序列练上去就行了，不用再用SUMO构建重组蛋白的对吧？？我今天也找到这个，对这个载体有点不懂，所以想多问问下，谢谢你咯额
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下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
7楼2015-03-23 21:50:24
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wuwenmei

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小小cool at 2015-03-23 20:50:13
我用过自己构建的sumo载体,还行
...

你是在那个载体上加了SUMO？这个你可以用PCR合成SUMO 融合蛋白，就是重叠延伸PCR的原理，再加上你连接的载体上也行。你那个载体重新构建的？
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下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
8楼2015-03-23 21:54:27
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wuwenmei

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ptttmt at 2015-03-23 14:39:18
invitrogen公司的pET-SUMO载体，TA克隆法构建

有没有参考文献的可以看看呀，我觉得你这个就是我要的，谢谢你呀，对我很重要
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下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
9楼2015-03-23 21:58:38
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涅槃之曦

铁虫 (正式写手)
我都不知道这些呢

[ 发自小木虫客户端 ]
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10楼2015-03-23 22:07:23
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