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flowerlee

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA变性 已有1人参与

怎样保持DNA变性状态,我用单链DNA来恢复荧光,谢谢大神指点!
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木木1995虫虫

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
高温保持DNA变性啊
2楼2015-03-23 10:11:00
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flowerlee

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 木木1995虫虫 at 2015-03-23 10:11:00
高温保持DNA变性啊

可是我的后续实验不能一直保持高温啊,我想用一些简单的试剂!
3楼2015-03-23 14:20:46
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木木1995虫虫

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
flowerlee(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-03-23 19:28:19
引用回帖:
3楼: Originally posted by flowerlee at 2015-03-23 14:20:46
可是我的后续实验不能一直保持高温啊,我想用一些简单的试剂!...

DNA变性的几种方法及原理:
加热:高温(70℃以上)可破坏碱基间的氢键。
离子强度:提高溶液的离子强度,可中和DNA分子链上磷酸基团的负电荷,降低它们之间的排斥力,稳定DNA的结构。
极端的pH值:pH<1时,DNA的磷酸二酯键会被水解;pH>11.3时,DNA的所有氢键断裂。
疏水作用:甲醇可增加碱基的溶解度,三氟醋酸钠可降低DNA分子的疏水作用,破坏双螺旋结构引起变性。
尿素及甲酰胺:它们可与碱基间形成氢键。
4楼2015-03-23 14:39:40
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