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flowerlee

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA变性 已有1人参与

怎样保持DNA变性状态，我用单链DNA来恢复荧光，谢谢大神指点！
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1楼 2015-03-23 09:25:19
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木木1995虫虫

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
高温保持DNA变性啊
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2楼2015-03-23 10:11:00
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flowerlee

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 木木1995虫虫 at 2015-03-23 10:11:00
高温保持DNA变性啊

可是我的后续实验不能一直保持高温啊，我想用一些简单的试剂！
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3楼2015-03-23 14:20:46
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木木1995虫虫

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
flowerlee(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-03-23 19:28:19
引用回帖:
3楼: Originally posted by flowerlee at 2015-03-23 14:20:46
可是我的后续实验不能一直保持高温啊，我想用一些简单的试剂！...

DNA变性的几种方法及原理：
加热：高温（70℃以上）可破坏碱基间的氢键。
离子强度：提高溶液的离子强度，可中和DNA分子链上磷酸基团的负电荷，降低它们之间的排斥力，稳定DNA的结构。
极端的pH值：pH＜1时，DNA的磷酸二酯键会被水解；pH＞11.3时，DNA的所有氢键断裂。
疏水作用：甲醇可增加碱基的溶解度，三氟醋酸钠可降低DNA分子的疏水作用，破坏双螺旋结构引起变性。
尿素及甲酰胺：它们可与碱基间形成氢键。
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4楼2015-03-23 14:39:40
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