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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 化学分析 » HPLC
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txyu

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC 已有1人参与

HPLC含量测定，采用等度（13%乙腈）走时出峰太晚（40min)，但是改变流动相比例后目标峰总是包有杂质峰，请问有什么办法可以保证峰纯度的前提下缩短出峰时间？能不能走降梯度？
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选择比毅力更重要
1楼 2015-03-22 15:11:38
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
改为梯度洗脱即可。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
2楼2015-03-22 15:22:23
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txyu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by archbishop at 2015-03-22 15:22:23
改为梯度洗脱即可。

试过许多不同比例的梯度洗脱了  总是包有杂质  还是等度才能分开杂质，现在的疑问是能不能通过较短时间的高比例有机相缩短出峰时间，再降到低比例等度分离目标成分？
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选择比毅力更重要
3楼2015-03-22 16:02:42
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轩辕义

铜虫 (正式写手)
只要有想法，就去试验，祝好

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2015-03-22 16:43:24
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
3楼: Originally posted by txyu at 2015-03-22 16:02:42
试过许多不同比例的梯度洗脱了  总是包有杂质  还是等度才能分开杂质，现在的疑问是能不能通过较短时间的高比例有机相缩短出峰时间，再降到低比例等度分离目标成分？...

不太明白。你是要让有机相比例先高后低？
我开发新方法时通常是从全梯度开始。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
5楼2015-03-22 17:00:33
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jwr

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
txyu: 金币+10, ★有帮助 2015-03-24 09:48:04
可以考虑流动相中加点缓冲盐，调节一下流动相的PH值，对于目标峰的纯度是有帮助的！
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6楼2015-03-22 20:52:22
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txyu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by jwr at 2015-03-22 20:52:22
可以考虑流动相中加点缓冲盐，调节一下流动相的PH值，对于目标峰的纯度是有帮助的！

就是一个黄酮苷，酸性很强，尝试了不同PH的酸水溶液，还是包有小峰，想问一下，如果目标化合物包有一点小杂峰的话，其对含量测定的方法学建立影响大吗？差不多到什么程度的纯度就可以了？
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选择比毅力更重要
7楼2015-03-24 09:47:57
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