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txyu

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC 已有1人参与

HPLC含量测定,采用等度(13%乙腈)走时出峰太晚(40min),但是改变流动相比例后目标峰总是包有杂质峰,请问有什么办法可以保证峰纯度的前提下缩短出峰时间?能不能走降梯度?
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

改为梯度洗脱即可。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
2楼2015-03-22 15:22:23
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txyu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by archbishop at 2015-03-22 15:22:23
改为梯度洗脱即可。

试过许多不同比例的梯度洗脱了  总是包有杂质  还是等度才能分开杂质,现在的疑问是能不能通过较短时间的高比例有机相缩短出峰时间,再降到低比例等度分离目标成分?
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3楼2015-03-22 16:02:42
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轩辕义

铜虫 (正式写手)

只要有想法,就去试验,祝好

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-03-22 16:43:24
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

引用回帖:
3楼: Originally posted by txyu at 2015-03-22 16:02:42
试过许多不同比例的梯度洗脱了  总是包有杂质  还是等度才能分开杂质,现在的疑问是能不能通过较短时间的高比例有机相缩短出峰时间,再降到低比例等度分离目标成分?...

不太明白。你是要让有机相比例先高后低?
我开发新方法时通常是从全梯度开始。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
5楼2015-03-22 17:00:33
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jwr

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
txyu: 金币+10, ★有帮助 2015-03-24 09:48:04
可以考虑流动相中加点缓冲盐,调节一下流动相的PH值,对于目标峰的纯度是有帮助的!
6楼2015-03-22 20:52:22
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txyu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by jwr at 2015-03-22 20:52:22
可以考虑流动相中加点缓冲盐,调节一下流动相的PH值,对于目标峰的纯度是有帮助的!

就是一个黄酮苷,酸性很强,尝试了不同PH的酸水溶液,还是包有小峰,想问一下,如果目标化合物包有一点小杂峰的话,其对含量测定的方法学建立影响大吗?差不多到什么程度的纯度就可以了?
选择比毅力更重要
7楼2015-03-24 09:47:57
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