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蝈蝈小胖

木虫 (正式写手)

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[交流] 神经元细胞胶质细胞共培养已有1人参与

请问有没有做过神经元细胞和胶质细胞共培养的呢？真心求protocol以及一些指点，谢谢各位了！

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1楼 2015-03-22 13:55:39

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lidong.0107

铜虫 (小有名气)

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专业: 蛋白质组学

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1、用95-100%的乙醇快速清洗分离的新鲜组织1次，再用预冷PBS洗2次。用解剖镊子和剪刀去除组织中残留的脂肪。
2、将组织样品放入含上述消化液的无菌培养皿中，37℃消化1-3小时。
3、将消化后的组织低速离心（1000rpm）8分钟，去除上清。
4、将细胞沉淀重悬于5ml的0.25%胰酶/EDTA中，置于37℃ 10分钟。
5、加入10ml 含10% FBS 的DMEM，用70um孔径的过滤器过滤细胞悬液，收集过滤后的细胞悬液，低速1000rpm 离心10 分钟，去除上清。
6、加入10ml的PBS，洗1次，低速离心5分钟。
7、重悬细胞沉淀于CO培养基中，接种于T25或T75的培养瓶中共培养。

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