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急救··· 分子生物学题目
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你认为在破裂解法过程中使用的solutionⅠ .Ⅱ . Ⅲ 有哪种溶液或者哪些成分可以省略？ 为什么啊 ？？？ |
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raindrop8316
金虫 (正式写手)
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- 性别: MM
- 专业: 植物病理学
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伤心的雨(金币+5,VIP+0):厉害···
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solutionⅠ的作用主要是EDTA与Ca2+，Mg2+螯合，抑制DNase的活性，Tris-HCl维持pH值8.0。因此该溶液中的葡萄糖（或蔗糖）可以省略 solution Ⅱ 裂解细菌，变性蛋白和少量DNA，主要是NaOH，而不是SDS，所以叫“碱裂解法”。单独只用SDS也可以提取到少量DNA，因为SDS也是弱碱 solution Ⅲ使大部分蛋白质与DNA一起共沉淀。SDS与蛋白质结合后，由于solution Ⅲ中的醋酸钾（KAc）会与SDS形成PDS，PDS溶解度比SDS低很多，因此出现大量沉淀。可以用NH4Ac代替KAc。 [ Last edited by raindrop8316 on 2008-6-24 at 11:25 ] |
2楼2008-06-24 11:23:35
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