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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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伤心的雨

[交流] 急救··· 分子生物学题目

你认为在破裂解法过程中使用的solutionⅠ .Ⅱ . Ⅲ  有哪种溶液或者哪些成分可以省略?   为什么啊 ???

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raindrop8316

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
伤心的雨(金币+5,VIP+0):厉害···
solutionⅠ的作用主要是EDTA与Ca2+,Mg2+螯合,抑制DNase的活性,Tris-HCl维持pH值8.0。因此该溶液中的葡萄糖(或蔗糖)可以省略

solution Ⅱ 裂解细菌,变性蛋白和少量DNA,主要是NaOH,而不是SDS,所以叫“碱裂解法”。单独只用SDS也可以提取到少量DNA,因为SDS也是弱碱

solution Ⅲ使大部分蛋白质与DNA一起共沉淀。SDS与蛋白质结合后,由于solution Ⅲ中的醋酸钾(KAc)会与SDS形成PDS,PDS溶解度比SDS低很多,因此出现大量沉淀。可以用NH4Ac代替KAc。

[ Last edited by raindrop8316 on 2008-6-24 at 11:25 ]
书到用时方恨少 钱到月底不够花
2楼2008-06-24 11:23:35
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伤心的雨

楼上的MM   你的回答好像不对啊 `   谁知道正确答案` `  谢谢 急用啊```
3楼2008-06-26 15:54:20
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blackeyedliming

你的意思是菌裂解提质粒吗?还是提蛋白或核酸?连这都没说明,怎么回答你啊
4楼2008-06-27 09:11:07
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伤心的雨

是 ··菌裂解提取质粒
5楼2008-06-28 21:03:57
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hotdunk

金虫 (正式写手)

Sol I 可以省略,就用菌液或者水直接加Sol II 和Sol III也一样提得出,操作快点就是了。因为蔗糖起到悬浮细胞的作用,操作快点一样可以避免沉淀。EDTA是为了抑制DNase降解作用,操作完了TE里的EDTA自然就会保护DNA了,所以Sol I可以省略~

打完收工~
爱情来得快去得也快,只有猪肉卷是永恒的!
6楼2008-06-28 22:22:25
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