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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 求助“”水酶法提取菜籽蛋白”解疑，望多多支持::>_<::
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笨笨的梦

金虫 (正式写手)

[求助] 求助“”水酶法提取菜籽蛋白”解疑，望多多支持::>_<:: 已有1人参与

大家好:
        请问有没有做水酶法提取油菜籽渣中蛋白质研究的老师，学姐，学长或者同学？因为目前在做这个课题的本科毕业实验，我也查了不少文献，可是还是有很多地方不明白，并且实验进行得很不顺利。想向做过的前辈们或者同学咨询一下，万分感谢::>_<::::>_<::
当然金币肯定不会少，望大家多多支持(∩_∩)～

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1楼 2015-03-18 22:46:22
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帖航

银虫 (小有名气)
你要说有哪些问题才行！
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笨笨的梦
2楼2015-03-20 10:45:28
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笨笨的梦

金虫 (正式写手)
送红花一朵
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2楼: Originally posted by 帖航 at 2015-03-20 10:45:28
你要说有哪些问题才行！

你好，主要是主酶和辅酶（也就是复合酶）的比例等相关问题。请问你做过吗？
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3楼2015-03-20 13:56:10
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帖航

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 笨笨的梦 at 2015-03-20 13:56:10
你好，主要是主酶和辅酶（也就是复合酶）的比例等相关问题。请问你做过吗？...

你所说的复合酶是指，双细胞壁酶，还是细胞壁酶+蛋白酶，还是双蛋白酶，还是其他什么酶。你是不是才做实验，你最好把你的研究内容，实验方法简单说明一下，然后针对那些方面有哪些问题，这样具体的问人家才好回答。如果单纯的看你的问题，两个酶添加比例的问题，那么我也只能说，控制其他条件不变做两个酶比的单因子变量。
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笨笨的梦 笨笨的梦
4楼2015-03-20 16:37:31
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quan3145
祝福   祝福
5楼2015-03-20 16:54:02
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笨笨的梦

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by quan3145 at 2015-03-20 16:54:02
祝福   祝福

谢谢支持(∩_∩)

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6楼2015-03-21 07:36:42
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笨笨的梦

金虫 (正式写手)
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4楼: Originally posted by 帖航 at 2015-03-20 16:37:31
你所说的复合酶是指，双细胞壁酶，还是细胞壁酶+蛋白酶，还是双蛋白酶，还是其他什么酶。你是不是才做实验，你最好把你的研究内容，实验方法简单说明一下，然后针对那些方面有哪些问题，这样具体的问人家才好回答。 ...

嗯嗯，非常感谢(∩_∩)我们的实验确实刚开始不久，我会再详细整理一下。把问题细化，向你咨询的。真的非常感谢::>_<::

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7楼2015-03-21 07:40:34
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笨笨的梦

金虫 (正式写手)
送红花一朵
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4楼: Originally posted by 帖航 at 2015-03-20 16:37:31
你所说的复合酶是指，双细胞壁酶，还是细胞壁酶+蛋白酶，还是双蛋白酶，还是其他什么酶。你是不是才做实验，你最好把你的研究内容，实验方法简单说明一下，然后针对那些方面有哪些问题，这样具体的问人家才好回答。 ...

你好，我整理了一下我们的实验。大致思路如下:用水酶法酶解油菜籽，初次酶（复合酶）解后获得残渣；（PS :这部分学姐已经做完了，老师让我们直接用学姐的最优条件，酶解获得残渣）
我们主要做残渣的二次酶解，获得可溶性蛋白。关于渣子，老师先让我们确定一种主酶（酸、碱、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶），再确定辅酶（果胶酶、纤维素酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶），然后再进行双酶水解。我想问:确定主酶和辅酶时，需要在它们最适条件（温度、PH ）下进行吗？还有加酶量、酶反应时间、离心转速和时间是如何确定？

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8楼2015-03-22 07:09:05
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帖航

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 笨笨的梦 at 2015-03-22 07:09:05
你好，我整理了一下我们的实验。大致思路如下:用水酶法酶解油菜籽，初次酶（复合酶）解后获得残渣；（PS :这部分学姐已经做完了，老师让我们直接用学姐的最优条件，酶解获得残渣）
我们主要做残渣的二次酶解，获得 ...

先确定主酶，在各个酶自己的最适pH及温度下，控制时间及添加量，看那个酶效果最好，然后再对该酶做单因子变量，同样对辅酶做一样的实验。然后这两个酶的比例问题，你需要做正交实验。一个正交实验就够一篇本科论文了。所以你的内容还是有点多的。至于离心的问题，你问问你学姐，蛋白类的一般是8，000g
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笨笨的梦
9楼2015-03-23 11:09:31
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笨笨的梦

金虫 (正式写手)
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9楼: Originally posted by 帖航 at 2015-03-23 11:09:31
先确定主酶，在各个酶自己的最适pH及温度下，控制时间及添加量，看那个酶效果最好，然后再对该酶做单因子变量，同样对辅酶做一样的实验。然后这两个酶的比例问题，你需要做正交实验。一个正交实验就够一篇本科论文 ...

嗯嗯，就是这样。可是光单因素实验就花不少时间，可不可以不做正交呀？这样可以写论文吗？老师说:菜籽渣（强调是菜籽渣，不是油菜籽）这部分没有人做过，查这方面文献也没有。这样可以吗？::>_<::

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10楼2015-03-23 13:11:36
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