| 查看: 454 | 回复: 0 | |||
matthewtai木虫 (小有名气)
|
[求助]
做激酶复合物时，加ATP产生沉淀，请教各位该如何改进反应，谢谢！
|
| 具体情况如下：我需要做一个人源激酶，这个激酶由两个亚基组成。我通过原核表达把两个亚基表达出来，想通过反应将这两个亚基结合并激活。反应物如下：两个亚基，缓冲液，无机盐，ATP，真核裂解液。在加完蛋白、缓冲液、无机盐、真核裂解液时还是澄清的，一加入ATP后就会产生浑浊。本人也调整了不同浓度的ATP以及蛋白浓度，但还是有许多沉淀产生。请问应该如何优化这个反应？是不是我加东西的顺序有问题？还有如何检测蛋白复合物，用SDS-PAGE的话，又会把复合好的蛋白再分开无法检测到是否有复合物产生。请各位赐教，非常感谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
情人节自我反思：在爱情中有过遗憾吗？
已经有6人回复
-
基金正文30页指的是报告正文还是整个申请书
已经有4人回复
-
今年春晚有几个节目很不错，点赞！
已经有6人回复
-
球磨粉体时遇到了大的问题，请指教！
已经有15人回复
-
过年走亲戚时感受到了所开私家车的鄙视链
已经有5人回复
-
江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后
已经有3人回复
点击这里搜索更多相关资源