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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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lulonghai

金虫 (小有名气)

[求助] 基线问题 已有3人参与

最近做3.1类原料药，仪器为Waters ACQUITY UPLC , 色谱柱为常规的色谱柱，采用的流动相为0.05%TFA水和0.05%TFA乙腈，在220nm波长下0.05%TFA乙腈：0.05%TFA水（90:10）时，基线非常难看，波动很大, 像进了气泡样。而在260nm下看此段基线非常平稳，因此可以排除进了气泡问题，我尝试按相同梯度用乙腈：水走，基线非常平稳。所以我怀疑是TFA引起的，如此如何解决呢？我的流动相条件如下：图谱见附件。
时间（min) 0.05%TFA乙腈 0.05%TFA水
0 10% 90%
10 40% 60%
25 90% 10%
50 90% 10%
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  • 附件 1 : blank_solution-220nm.pdf
    • 2015-03-12 14:21:00, 74.01 K
  • 附件 2 : 220nm放大图.pdf
    • 2015-03-12 14:21:05, 78.34 K
  • 附件 3 : blank_solution-260nm.pdf
    • 2015-03-12 14:21:09, 74.76 K

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1楼 2015-03-12 14:21:26
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xiaomomo83

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lulonghai(星海慧儿代发): 金币+2, 多谢回帖交流 2015-03-13 21:11:28
lulonghai: 金币+5 2015-03-16 09:31:00
在220nm波长下,三氟乙酸是有吸收的。走梯度肯定会出现严重的基线波动。如果你不是走液质，建议你换成磷酸盐吧，它在低波长没有吸收。效果可能好很多，或者直接先用磷酸水试试，直接调你要的PH值。此外，我也感觉目前梯度还可以优化的。楼主先这么试试，有效了记得来反馈
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lulonghai
3楼2015-03-12 15:34:12
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cenlm

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lulonghai(星海慧儿代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2015-03-13 21:11:12
梯度变化太大，是否有必要这么宽的梯度？
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加油
2楼2015-03-12 15:05:43
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lulonghai

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaomomo83 at 2015-03-12 15:34:12
在220nm波长下,三氟乙酸是有吸收的。走梯度肯定会出现严重的基线波动。如果你不是走液质，建议你换成磷酸盐吧，它在低波长没有吸收。效果可能好很多，或者直接先用磷酸水试试，直接调你要的PH值。此外，我也感觉目前 ...

以前就试过醋酸铵缓冲液（PH5.70）和0.1%磷酸水溶液（PH2.0），主峰峰形差拖尾，没TFA好。用TFA空白溶液在220nm都会出些小杂质峰，疑跟TFA的折射率有关。我用的TFA是HPLC级的
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4楼2015-03-12 16:45:01
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wetw64

新虫 (初入文坛)
这梯度有问题，变化宽
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5楼2015-03-13 08:54:21
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