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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 关于拟南芥转基因的一些问题已有4人参与

各位大神:我现在关于拟南芥转基因中的农杆菌浸花法有一些疑问,我现在按照5%的蔗糖+0.005%的silwetL-77的侵染液配方总是转不出来,是我的配方有问题吗?
还有一个就是,拟南芥侵染完后避光保湿是必须的吗?是因为啥呢?
最后一个问题是为何我拟南芥的花在侵染完后容易死,长不出荚来呢?
求大神解答
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zlms_123

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
lwk5716: 金币+4, ★★★很有帮助 2015-03-16 23:19:12
转不出来是指没有得到阳性植株吗?用于转化的拟南芥的生长状况也很重要,壮的苗一般转化效率较高。隔3-5天转一次,连续转2-3次。Silwet L-77的用量不能多,1ml菌液加0.2ul就够了,因为它有毒。
我一直都是用枪头吸取菌液滴到花蕾上,让菌液保持几分钟后再滴一次,最后用纸巾把多余的菌液吸干净,不然残留的菌液很容易让植株死掉。
侵染完后避光保湿是为了农杆菌侵染吧,具体我也不清楚。
追求
16楼2015-03-16 11:48:02
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lwk5716: 金币+6, ★★★很有帮助 2015-03-13 09:13:59
拟南芥的花在侵染完后容易死,长不出荚来是不是因为农杆菌毒性太强、侵染时间过长、农杆菌OD值太高引起的?
拟南芥侵染完后避光保湿是书上步骤里的。原因应该是为了让侵染的叶片有一个缓冲生长的作用。毕竟生病了一场,需要好好休养才能继续生长。
2楼2015-03-12 15:49:47
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2015-03-12 15:49:47
拟南芥的花在侵染完后容易死,长不出荚来是不是因为农杆菌毒性太强、侵染时间过长、农杆菌OD值太高引起的?
拟南芥侵染完后避光保湿是书上步骤里的。原因应该是为了让侵染的叶片有一个缓冲生长的作用。毕竟生病了一 ...

我的浸染时间也就是不到1分钟,30秒左右,OD值在0.6-1.0左右,我怀疑是不是Silwet的原因?
3楼2015-03-13 09:15:35
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匿名

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lwk5716: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-03-13 13:55:48
本帖仅楼主可见
4楼2015-03-13 12:39:49
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