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运动发酵单胞菌单胞菌电转化问题
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本人最近在做运动发酵单胞菌的表达，用到的是pBBR1MCS-2载体，抗性为kana；尝试将改造后的是pBBR1MCS-2转入ZM4(在多克隆位点增加启动子、终止、目的基因等，游离表达)。尝试了DNA加入，0.5-2ug，OD600在0.4-1，电击压力1.8-3.0KV(2mm电转杯），10%甘油悬浮，每管分装100uL，点击后恢复时间3-20h...但是前后试了不下10次，都没转进去， 有试过在摸索条件时将pBBR1MCS-2在0.5ug，OD600在0.8，点击压力2kv，复性时间6h转入.... 但是重复性极低，载重复这种条件又不行了....3 哪位大神，在这方面经验较多，指点迷津.....  |
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