| 查看: 517 | 回复: 1 | ||
[求助]
运动发酵单胞菌单胞菌电转化问题
|
|
本人最近在做运动发酵单胞菌的表达，用到的是pBBR1MCS-2载体，抗性为kana；尝试将改造后的是pBBR1MCS-2转入ZM4(在多克隆位点增加启动子、终止、目的基因等，游离表达)。尝试了DNA加入，0.5-2ug，OD600在0.4-1，电击压力1.8-3.0KV(2mm电转杯），10%甘油悬浮，每管分装100uL，点击后恢复时间3-20h...但是前后试了不下10次，都没转进去， 有试过在摸索条件时将pBBR1MCS-2在0.5ug，OD600在0.8，点击压力2kv，复性时间6h转入.... 但是重复性极低，载重复这种条件又不行了....3 哪位大神，在这方面经验较多，指点迷津.....  |
回复此楼» 猜你喜欢
2027博士申请-临床检验诊断学、病原生物学、微生物方向
已经有5人回复
-
【长期招聘】复旦大学 AI 制药实验室 博士后招聘
已经有10人回复
-
各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧
已经有4人回复
-
越来越担心硕士毕业后没有竞争力了
已经有15人回复
-
申博自荐 2篇一区TOP+1篇EI+2公开发明专利 2027博士申请
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 厌氧菌培养需要多少时间？
已经有11人回复
- 兼性厌氧菌运动发酵单胞菌的培养
已经有7人回复
2楼2018-12-21 19:20:28