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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » maker中间有很多不清晰的条带是什么情况
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在下狒狒

新虫 (初入文坛)

[交流] maker中间有很多不清晰的条带是什么情况已有6人参与

我跑的胶maker应该是只有六个条带，但是再六个主要的条带之间有很多不是很清晰的条带，想问这个是变性不充分的问题么？延长变性时间是不是会好一点。

maker中间有很多不清晰的条带是什么情况
maker的问题.jpg
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1楼2015-02-28 10:58:57
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二妖酱

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 在下狒狒 at 2015-02-28 11:02:08
而且跑到低分子量之后的条带就很不清楚了，基本上变成了一团，有什么解决的方法么。
我的方法是上层堆积胶浓度4%，下层分离胶浓度12%。每孔上样量20ul，保证蛋白质浓度在100ug/ml以上。70v跑30min，110v跑90min（但 ...

是不是后来电压太大小分子来不及停都聚一起了（猜的）。我一直都是一个电压跑，80左右，没出现过这个状况，我觉得一个电压跑的更稳，但是很慢。

[ 发自小木虫客户端 ]
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走走停停~停停走走~风景就在眼前
12楼2015-03-01 16:24:24
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在下狒狒

新虫 (初入文坛)
而且跑到低分子量之后的条带就很不清楚了，基本上变成了一团，有什么解决的方法么。
我的方法是上层堆积胶浓度4%，下层分离胶浓度12%。每孔上样量20ul，保证蛋白质浓度在100ug/ml以上。70v跑30min，110v跑90min（但基本上这个时间跑不完，需要大概两个小时）。是不是分离胶跑的电压有点小，时间有点长造成的。
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2楼2015-02-28 11:02:08
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十七--十七

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不是时间造成的，具体不清楚。确保maker没有放坏？
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3楼2015-02-28 11:05:16
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在下狒狒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 十七--十七 at 2015-02-28 11:05:16
不是时间造成的，具体不清楚。确保maker没有放坏？

maker是新买分装的，solarbio公司的。
延长电泳的时间不会造成条带模糊么？
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4楼2015-02-28 11:39:41
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