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idea2020

银虫 (小有名气)

[求助] 吐温20 检测方法可行性探讨,求助。已有2人参与

我准备用以下方法检测吐温20

色谱柱:Waters Oasis MAX column (20 mm × 2.1 mm, 30-m particle size)
流动相:A:2%甲酸,水,10mM npn;
             B:2%甲酸,异丙醇,10mM npn;
梯度洗脱
检测器:荧光检测器
检测波长 :350nm,420nm

请大家帮我看一下,这个方案有没有问题。

或求用荧光检测器检测吐温20的比较方便的方法。
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

如果做衍生的话应该是可以的。直接测的话你选的两个波长几乎都没有多少吸收。

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-02-12 12:34:10
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
TWEEN系列是常用表面活性剂,应该有标准检测方法。不知你查过没有。

你的检测波长是怎么定的?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-02-09 14:42:43
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idea2020

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by superyeast at 2015-02-09 14:42:43
TWEEN系列是常用表面活性剂,应该有标准检测方法。不知你查过没有。

你的检测波长是怎么定的?

我有查过,tween 检测主要就是紫外(操作复杂);荧光衍生液相色谱法(前处理跟紫外检测一致)(Analysis Methods of Polysorbate 20A New Method to Assess the Stability of Polysorbate 20 and Established Methods that May Overlook Degraded Polysorbate 20);蒸发光散射检测(Quantitation of polysorbate 20 in protein solutions using mixe d-mode
chromatography and evaporative light scattering detection)3种。
蒸发光散射检测方法能使蛋白与tween 分离所以前处理简单,只是我公司没有这个检测器,只有荧光检测器。所以综合了前面两篇文献,做了实验方案设计。
希望得到指点,后续对试剂进行采购。
3楼2015-02-12 09:24:57
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zym731

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

用蒸发光检测器检测,我用的色谱条件为
色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C18(5um,4.6×150mm);柱温:室温;检测器:ELSD(漂移管温度45℃,N2流速1.5ml/min)
4.2、流动相
   
时间(min)        A(水)        B(乙腈)
0        95        5
5        95        5
6        40        60
10        20        80
15        20        80
15.01        95        5
20        95        5
身体健康
5楼2015-09-09 15:19:13
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