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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 吐温20 检测方法可行性探讨，求助。
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idea2020

铜虫 (小有名气)

[求助] 吐温20 检测方法可行性探讨，求助。 已有2人参与

我准备用以下方法检测吐温20

色谱柱：Waters Oasis MAX column (20 mm × 2.1 mm, 30-m particle size)
流动相：A：2%甲酸，水，10mM npn；
             B：2%甲酸，异丙醇，10mM npn；
梯度洗脱
检测器：荧光检测器
检测波长 ：350nm,420nm

请大家帮我看一下，这个方案有没有问题。

或求用荧光检测器检测吐温20的比较方便的方法。
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1楼 2015-02-09 10:47:42
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idea2020

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by superyeast at 2015-02-09 14:42:43
TWEEN系列是常用表面活性剂，应该有标准检测方法。不知你查过没有。

你的检测波长是怎么定的？

我有查过，tween 检测主要就是紫外（操作复杂）;荧光衍生液相色谱法（前处理跟紫外检测一致）（Analysis Methods of Polysorbate 20A New Method to Assess the Stability of Polysorbate 20 and Established Methods that May Overlook Degraded Polysorbate 20);蒸发光散射检测（Quantitation of polysorbate 20 in protein solutions using mixe d-mode
chromatography and evaporative light scattering detection）3种。
蒸发光散射检测方法能使蛋白与tween 分离所以前处理简单，只是我公司没有这个检测器，只有荧光检测器。所以综合了前面两篇文献，做了实验方案设计。
希望得到指点，后续对试剂进行采购。
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3楼2015-02-12 09:24:57
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
TWEEN系列是常用表面活性剂，应该有标准检测方法。不知你查过没有。

你的检测波长是怎么定的？

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2楼2015-02-09 14:42:43
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

如果做衍生的话应该是可以的。直接测的话你选的两个波长几乎都没有多少吸收。

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2015-02-12 12:34:10
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zym731

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

用蒸发光检测器检测，我用的色谱条件为
色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18（5um，4.6×150mm）；柱温：室温；检测器：ELSD（漂移管温度45℃，N2流速1.5ml/min）
4.2、流动相
   
时间（min）        A（水）        B（乙腈）
0        95        5
5        95        5
6        40        60
10        20        80
15        20        80
15.01        95        5
20        95        5
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身体健康
5楼2015-09-09 15:19:13
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