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液相求助（新手问路）
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第一次用液相，反相柱，其他参数不清楚了 走基线，用2%甲醇-98%水走，流速0.5ml/ml 流速一打大，压力就上去（最大到16），所以流速不敢上去 洗了之后，再用调节流动相，流速不变，20%甲醇-80%水， 走了一会儿走了一个大峰出来，后来压力又搞起来了 我又用2%甲醇-98%水走，基线走平后 再换成50%甲醇-50%水走，又走了一个大峰出来， 响应值第一个有300maU,后面那个有100多 请高手指点， 1.怎么老是会洗不干净的 2.流速一高，压力就大起来，超过15，（据说是以前的做的时候，过滤的不够干净） 该怎么办啊！谢谢了 |
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切换流动相 出现峰是正常的， 泵的压力与流动相的年度系数有关
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dnp(金币+2,VIP+0):哈哈，自然要多多鼓励，谢谢参与讨论^_^
dnp(金币+2,VIP+0):哈哈，自然要多多鼓励，谢谢参与讨论^_^
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我做液相快一年了 开始的时候很谨慎，液相太经贵了。现在还是害怕，尤其是那个泵的压力呀。 泵的压力与流动相的粘度系数有关 对于HP1100,100%水，流速0.6，压力有46bar, 100%甲醇就会小很多 所以你提高水的比例，压力肯定会上升的。 切换流动相的瞬间，出现大峰是正常的，如4楼所说，正常。最后只有基线保持在0.2mau之间就算冲平。 书有《化学工业出版社》色谱技术丛书《液相色谱检测方法》，这都是理论的，还要靠操作和多向仪器老师学习。 我是新虫，没注册多久，头一次回答问题，请多鼓励。 |
6楼2008-06-11 20:23:37
2楼2008-06-10 22:26:42
maxuedong
至尊木虫 (著名写手)
小木虫终身顾问
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 21195.5
- 红花: 2
- 帖子: 2248
- 在线: 215.2小时
- 虫号: 158820
- 注册: 2006-01-07
- 性别: GG
- 专业: 色谱分析
3楼2008-06-11 07:55:49
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bill3604(金币+2,VIP+0):解释很详尽，那能不能推荐一本比较好的液相色谱书啊
bill3604(金币+2,VIP+0):解释很详尽，那能不能推荐一本比较好的液相色谱书啊
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我来给您解释：1 当您改变流动相的比例时，由于极性的改变，吸附在色谱柱上的部分物质被洗脱出来了，这表明你的色谱柱在上一次的进样后没有洗干净。这是正常现象，部分物质是会吸附在柱子上没办法洗脱下来的。这也是解释了为什么色谱柱用了一定时间就报废的原因。 2 压力的改变是因为你的流动相改变了，其与原来的比例不同，在突然改变的情况下，其极性等的变化会引起色谱柱固相相所受的压力不同而发生变化。 3 色谱柱出现14bar的压力是很正常的，当您的流速增大，其压力就会增大。 4 建议您看一些仪器分析方面的书，这些问题就会得到解决。  |
4楼2008-06-11 08:20:29
