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bill3604

铁虫 (小有名气)

[交流] 液相求助(新手问路)

第一次用液相,反相柱,其他参数不清楚了
走基线,用2%甲醇-98%水走,流速0.5ml/ml
流速一打大,压力就上去(最大到16),所以流速不敢上去
洗了之后,再用调节流动相,流速不变,20%甲醇-80%水,
走了一会儿走了一个大峰出来,后来压力又搞起来了
我又用2%甲醇-98%水走,基线走平后
再换成50%甲醇-50%水走,又走了一个大峰出来,
响应值第一个有300maU,后面那个有100多

请高手指点,
1.怎么老是会洗不干净的
2.流速一高,压力就大起来,超过15,(据说是以前的做的时候,过滤的不够干净)

该怎么办啊!谢谢了
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teachen

银虫 (小有名气)

★ ★
bill3604(金币+2,VIP+0):解释很详尽,那能不能推荐一本比较好的液相色谱书啊
我来给您解释:1 当您改变流动相的比例时,由于极性的改变,吸附在色谱柱上的部分物质被洗脱出来了,这表明你的色谱柱在上一次的进样后没有洗干净。这是正常现象,部分物质是会吸附在柱子上没办法洗脱下来的。这也是解释了为什么色谱柱用了一定时间就报废的原因。
2 压力的改变是因为你的流动相改变了,其与原来的比例不同,在突然改变的情况下,其极性等的变化会引起色谱柱固相相所受的压力不同而发生变化。
3 色谱柱出现14bar的压力是很正常的,当您的流速增大,其压力就会增大。
4 建议您看一些仪器分析方面的书,这些问题就会得到解决。
4楼2008-06-11 08:20:29
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dryfish

金虫 (著名写手)

见怪不怪,都是正常现象
2楼2008-06-10 22:26:42
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maxuedong

至尊木虫 (著名写手)

小木虫终身顾问

正常现象
平平淡淡才是真
3楼2008-06-11 07:55:49
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bill3604

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by teachen at 2008-6-11 08:20:
我来给您解释:1 当您改变流动相的比例时,由于极性的改变,吸附在色谱柱上的部分物质被洗脱出来了,这表明你的色谱柱在上一次的进样后没有洗干净。这是正常现象,部分物质是会吸附在柱子上没办法洗脱下来的。这也 ...

解释很详尽,那能不能推荐一本比较好的液相色谱书啊
5楼2008-06-11 12:03:40
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