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ruchang2013

铁虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白电泳 已有2人参与

我将基因重组到大肠杆菌染色体上，观察蛋白表达情况，结果蛋白电泳显示的酶表达不明显！是因为染色体表达的蛋白就是不明显吗
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1楼 2015-02-02 10:35:07
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13227213581

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
ruchang2013(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-02-02 21:08:51
大肠杆菌染色体重组只做过抗性改造，没做过表达。
做表达的话，为什么不整合到质粒上呢。表达量最高可以达到几十mg/l
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

ruchang2013
justbesunshine
2楼2015-02-02 15:45:41
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ruchang2013

铁虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 13227213581 at 2015-02-02 15:45:41
大肠杆菌染色体重组只做过抗性改造，没做过表达。
做表达的话，为什么不整合到质粒上呢。表达量最高可以达到几十mg/l

你好，外源基因重组到大肠杆菌上，能够稳定存在细胞内啊
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3楼2015-02-02 16:34:23
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13227213581

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ruchang2013 at 2015-02-02 16:34:23
你好，外源基因重组到大肠杆菌上，能够稳定存在细胞内啊...

就算是整合到大肠总DNA上，不给压力，也不能100%保证不掉，和质粒一样也会丢失
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justbesunshine
4楼2015-02-02 16:42:12
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九字江山

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
额，你这个重组到染色体是怎么整合的？你要研究是什么方向的？如果研究的是目的基因编码的蛋白质产物，完全可以采用将基因克隆到表达载体上再进行表达，这样原核蛋白表达的蛋白纯度也比较高，产量大，也能具有可溶性。
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5楼2015-02-03 10:06:48
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