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底物为胸苷,利用E.coli生物转化,HPLC检测出不明物质。
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最近我在做酶法生物转化的实验。 底物为胸苷,利用大肠杆菌菌体生物转化,在测酶活时HPLC检测到奇怪的物质。理论上酶活的定义是:每分钟产生 1 微摩尔/升 胸腺嘧啶所需要的酶量为一个酶活单位。 但是我在254nm检测波长下检测产生胸腺嘧啶含量时,发现反应到后期竟然将胸苷消耗完毕,但是也没有胸腺嘧啶产生,取而代之产生的是一个不明物质,单峰。 我将彻底反应后得到的反应液上清真空浓缩得到了米白色晶体,极性比较大,但是比胸苷极性低,比胸腺嘧啶极性更低。 请问有没有人做过生物转化的实验,有没有类似的事情发生? |
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