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xxdscdx

新虫 (初入文坛)

[求助] tRNA提取后跑8% Urea-PAGE,条带看不懂 已有1人参与

tRNA提取方法
过夜DH5a,离心去上清;180uL 10mM醋酸镁和Tris-HCl(pH7.4)重悬;200uL 水饱和酚裂解20min(室温摇床);离心取水相上清(~150uL);0.1 vol 5M NaCl,2 vol Absolute Ethanol沉淀RNA(-20度静置1hr),离心,小心去上清;加入磷酸钠缓冲液(pH7.0)溶解沉淀;溶液临时4度保存。

8% Urea-PAGE
使用普通核酸6* Loading Buffer,每40uL RNA样品中加入10uL Buf。
电泳参数,120V恒压,电泳45min,每孔上样量10uL。
跑出来很多带,不知道是什么?难道是23S,18S,5S这些rRNA吗?最下面最粗的是tRNA吗?

tRNA提取后跑8% Urea-PAGE,条带看不懂
1-w.jpg
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幽谷兰

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你好,请问你最后提取到纯的总tRNA了吗?我也做过这个实验,结果也不是很好……
2楼2018-04-03 15:38:09
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