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新虫 (初入文坛)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 10.3
帖子: 7
在线: 2.6小时
虫号: 2993966
注册: 2014-02-25
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] tRNA提取后跑8% Urea-PAGE，条带看不懂已有1人参与

tRNA提取方法
过夜DH5a，离心去上清；180uL 10mM醋酸镁和Tris-HCl（pH7.4）重悬；200uL 水饱和酚裂解20min（室温摇床）；离心取水相上清（~150uL）；0.1 vol 5M NaCl，2 vol Absolute Ethanol沉淀RNA（-20度静置1hr），离心，小心去上清；加入磷酸钠缓冲液（pH7.0）溶解沉淀；溶液临时4度保存。

8% Urea-PAGE
使用普通核酸6* Loading Buffer，每40uL RNA样品中加入10uL Buf。
电泳参数，120V恒压，电泳45min，每孔上样量10uL。
跑出来很多带，不知道是什么？难道是23S，18S，5S这些rRNA吗？最下面最粗的是tRNA吗？