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xiaoyuaaa

新虫 (初入文坛)

[交流] 用LB培养猪粪中大肠杆菌24h长不出,是否因样品放-20度冰柜四个月冻死? 已有3人参与

核心问题求教:
试验是培养计数猪粪的大肠杆菌和乳酸菌(购买的MRS培养基),不过猪粪放-20度冰柜四个月了,不知道能否长出?还是冻死了?
次核心问题:
试验主要是对大肠杆菌菌群计数,是否应该用MAC或者EMB鉴别培养基??
三:
配大肠杆菌的LB培养基,看许多文献上都提到是用胰蛋白胨,现在实验室只有普通蛋白胨,就做试验了,请问用普通蛋白胨或者胰蛋白胨对实验结果是否影响?
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yjj1983112

至尊木虫 (知名作家)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励交流! 2015-01-31 20:36:19
对大肠杆菌计数最好是使用麦康凯或伊红美蓝培养基。但如果样品放在-20度4个月后,样品没加保护剂,菌肯定会死亡的。建议重新采样。普通蛋白胨或者胰蛋白胨对实验结果影响并不大。
科研静心
2楼2015-01-31 15:18:42
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xiaoyuaaa

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yjj1983112 at 2015-01-31 15:18:42
对大肠杆菌计数最好是使用麦康凯或伊红美蓝培养基。但如果样品放在-20度4个月后,样品没加保护剂,菌肯定会死亡的。建议重新采样。普通蛋白胨或者胰蛋白胨对实验结果影响并不大。

谢谢!我准备换麦康凯琼脂了,请问结晶紫必须要加吗?
还有,我用mrs培养基36h成功培养出乳酸菌,推测粪样乳酸菌应该没死,那大肠杆菌应该也没事吧?
3楼2015-01-31 16:00:25
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skull123

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaoyuaaa at 2015-01-31 16:00:25
谢谢!我准备换麦康凯琼脂了,请问结晶紫必须要加吗?
还有,我用mrs培养基36h成功培养出乳酸菌,推测粪样乳酸菌应该没死,那大肠杆菌应该也没事吧?...

结晶紫是用来抑制革兰氏阳性菌生长的,样品-20度4个月,个人猜测大肠杆菌估计没死
4楼2015-01-31 21:43:01
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yjj1983112

至尊木虫 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaoyuaaa at 2015-01-31 16:00:25
谢谢!我准备换麦康凯琼脂了,请问结晶紫必须要加吗?
还有,我用mrs培养基36h成功培养出乳酸菌,推测粪样乳酸菌应该没死,那大肠杆菌应该也没事吧?...

结晶紫不是必须要加的。如果用MRS分离出来乳酸菌,那大肠杆菌应该也能分离到的。
科研静心
5楼2015-02-01 08:58:58
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xiaoyuaaa

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by skull123 at 2015-01-31 21:43:01
结晶紫是用来抑制革兰氏阳性菌生长的,样品-20度4个月,个人猜测大肠杆菌估计没死...

嗯嗯,我也是这样推测的,但是之前LB培养一批36h,长的很少,等今天下午的这次MAC培养的时间到了看看……一般大肠杆菌恒温37度培养24h就可以了吧?
6楼2015-02-02 09:29:05
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xiaoyuaaa

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by yjj1983112 at 2015-02-01 08:58:58
结晶紫不是必须要加的。如果用MRS分离出来乳酸菌,那大肠杆菌应该也能分离到的。...

好的,谢谢哈,我前两天LB培养一批36h,长的很少,等今天下午的这次MAC培养的时间到了看看……一般大肠杆菌恒温37度培养24h就可以了吧?
7楼2015-02-02 09:30:23
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yjj1983112

至尊木虫 (知名作家)

科研静心
8楼2015-02-02 19:30:08
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kika8014

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
长时间冷冻菌体活性肯定会比较低,可以尝试温度梯度,慢慢活化出来。蛋白胨影响应该不大的。
车到山前必有路
9楼2015-02-11 16:13:21
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