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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 等浓度FAM荧光基团标记DNA的荧光强度不同
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jackmill

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1楼 2015-01-31 13:01:34
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jackmill: 金币+18, ★★★★★最佳答案 2015-02-03 08:17:03
没事，荧光强度不一样很正常
荧光强度很容易被光漂白，而且单链DNA的二级结构也会影响荧光强度
如果FAM基团连着鸟嘌呤, FAM会一定程度上被鸟嘌呤quench
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
7楼2015-02-03 04:51:01
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Swift1204

新虫 (小有名气)
你的等浓度是按OD计算还是纳摩尔数计算？

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2楼2015-02-01 16:30:17
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jackmill

禁虫 (小有名气)
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3楼2015-02-01 23:01:49
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Swift1204

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jackmill at 2015-02-01 23:01:49
都是配成100微摩尔每升的储备液，一个是绿色的，一个是黄色的。
...

你都取1OD跑跑看！

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4楼2015-02-02 01:12:45
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jackmill(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-02-02 21:06:33
你配置的都是相同mol/l的DNA链，并且长度不一致，试想，若1条长度为100bp,
而另外一条为10000bp，其荧光强度能一样吗？当然你的DNA长度并不是差异这么大，
然而，只能解释为DNA长度不同导致荧光强度不同。或者，公司合成量不准确。
从图上看，似乎，第二条4倍强度也比第一条强度弱，因而，可能是公司的原因。。。。
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5楼2015-02-02 13:05:27
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jackmill

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6楼2015-02-02 19:24:47
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jackmill

禁虫 (小有名气)
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kkkkQ
8楼2015-02-03 08:16:07
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呼呼哈哈嘿

新虫 (初入文坛)
楼主，请问你这个fam标记dna的page胶呈像是怎么弄的？这个图片用什么仪器什么激发光照的？

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9楼2017-05-10 15:38:49
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kkkkQ

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by jackmill at 2015-02-03 08:16:07
谢谢了，我的长链上有好多G，应该是这个问题了，我也看到类似的文献报道了

你好，请问类似的文献在哪里看到的，我现在刚开始做这方面，做的是FAM修饰的DNA ，测荧光根本不出峰

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10楼2017-06-07 16:44:31
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