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浅语8905

新虫 (小有名气)

[求助] 转pKD46时转不进去已有4人参与

转pKD46时,氯化钙和电转法都试过了,可是还是没有转进去,不知道原因?感受态转别的质粒倒是没有问题,pKD46也可以转入别的菌中!
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jzplyy

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 张凡云 at 2015-01-31 02:23:39
你是用Red系统做敲除吧,要看你用的菌是什么菌,我也在做这个,目前做到了用pcp20消除FRT位点了,可以一起讨论一下。

师兄,你好,我是做大肠删除的,电转靶片段,平板上全是假阳性菌落,想请教一下什么原因,非常感谢!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
11楼2015-05-19 00:14:53
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张凡云

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-02-02 10:55:19
你是用Red系统做敲除吧,要看你用的菌是什么菌,我也在做这个,目前做到了用pcp20消除FRT位点了,可以一起讨论一下。
4楼2015-01-31 02:23:39
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浅语8905

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 张凡云 at 2015-01-31 02:23:39
你是用Red系统做敲除吧,要看你用的菌是什么菌,我也在做这个,目前做到了用pcp20消除FRT位点了,可以一起讨论一下。

我是转进去PKD46了,但是现在是长一段时间,菌就死了,不知道怎么解决呢,只能先不断活化了
5楼2015-02-01 20:39:10
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twinacmilan

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


浅语8905: 金币+1, 有帮助 2015-02-03 08:45:57
转进去pKD46注意保证培养温度低于30度,因为质粒是温敏型,高温容易造成质粒丢失
6楼2015-02-02 21:17:36
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