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半贴壁细胞的培养？
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| 请问半贴壁细胞是不是只有在大量细胞贴壁时才表示细胞状态良好？细胞要冻存时，对细胞状态有何要求？我最近养一种巨核细胞CHRF-288-11，生长很慢，是不是和换液过勤有关系，我一般2天换液一次，对贴壁的细胞不做处理，对于悬浮的进行离心换液，最近，更换一种血清，发现大量细胞悬浮，请帮忙指点,万分感谢！ |
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2楼2008-07-08 19:46:34
seahow
木虫 (著名写手)
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- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
3楼2008-07-12 20:32:07
★ ★ ★ ★ ★ ★
lixiaoyi1981(金币+6,VIP+0):ok，不错，谢谢
lixiaoyi1981(金币+6,VIP+0):ok，不错，谢谢
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如果生长缓慢，是与换液过勤有关系的 因为细胞生长时会向周围释放一些细胞因子，以达到细胞之间的交互作用 做过单细胞实验（如单抗筛选）的人可能都会在细胞培养时加入饲养细胞，也正是为达到这种目的 当细胞生长良好，尤其是培养基没有明显变色时（即培养基PH无明显变化）培养液中的代谢废物是很有限的，这时里面的细胞因子对细胞生长起关键作用 建议当培养液由红变微黄时换液 如果此时细胞未长满，可直接轻轻换液，以不吹起贴壁细胞为宜 如果长满，建议向下传代，但要保证一定比例，像生长缓慢的细胞可以按1：3传 冻存最好对数生长期 发现大量细胞悬浮，是不正常的 如果确实不好养，建议使用胎牛级血清，里面的营养成分、细胞因子丰富 楼主换血清出现的问题，很可能是换了小牛或新生牛血清所致，注意这几种血清对一些难养的细胞是有差异的 欢迎交流！  |
4楼2008-08-07 22:46:46