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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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Frank2007198

铜虫 (小有名气)

[交流] 单对引物为何PCR出两条片段?

采用单对引物的PCR,目的片段下还有一条亮度稍暗的条带,是假阳性吗?目的片段460bp,多出来的片段200bp左右。
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
直接回收目的带,亚克隆测序
3楼2008-06-08 19:17:52
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查看全部 5 个回答

wyr2006

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
应该是非特异性扩增。建议楼主选用巢式PCR,
产物效率会有大大的提高,基本不会出现非特异性扩增。

只要你所需的那段退火温度不异常,标准:PCR产物TM值不超过95度,就可以!
2楼2008-06-07 21:18:24
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jasco

木虫 (正式写手)


reasonspare(金币+1,VIP+0):积极交流奖
引用回帖:
Originally posted by 克隆大虾 at 2008-6-8 19:17:
直接回收目的带,亚克隆测序

此法正解!

200bp的非特异性条带不影响的啊
4楼2008-06-13 11:04:36
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