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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 单对引物为何PCR出两条片段？
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Frank2007198

铜虫 (小有名气)

[交流] 单对引物为何PCR出两条片段？

采用单对引物的PCR，目的片段下还有一条亮度稍暗的条带，是假阳性吗？目的片段460bp，多出来的片段200bp左右。
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1楼 2008-06-07 21:15:37
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wyr2006

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):谢谢分享，欢迎常来
应该是非特异性扩增。建议楼主选用巢式PCR，
产物效率会有大大的提高，基本不会出现非特异性扩增。

只要你所需的那段退火温度不异常，标准：PCR产物TM值不超过95度，就可以！
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2楼2008-06-07 21:18:24
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享，欢迎常来
直接回收目的带,亚克隆测序
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3楼2008-06-08 19:17:52
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jasco

木虫 (正式写手)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):积极交流奖
引用回帖:
Originally posted by 克隆大虾 at 2008-6-8 19:17:
直接回收目的带,亚克隆测序

此法正解！

200bp的非特异性条带不影响的啊
赞一下(10人) 回复此楼
4楼2008-06-13 11:04:36
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